新しく同定された癌遺伝子mafの構造と機能

新发现的癌基因maf的结构和功能

基本信息

  • 批准号:
    01015021
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3.07万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
  • 财政年份:
    1989
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1989 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

vーmaf遺伝子の構造と機能の関係を明らかにするため部分欠失、点変異を持つ変異遺伝子を作成し、レトロウイルスベクターに組み込んで細胞に感染させ、細胞癌化能を検定した。結論としてはmaf遺伝子産物に特徴的なロイシンジッパー構造とそのアミノ末端側の塩基性アミノ酸に富む領域が細胞癌化能に必須である事が明らかになった。またcーDNAクローニングによって2つの関連遺伝子mafBおよびmafKを同定しその部分構造を決定したところvーmafにおいて機能的に重要な部分が最も良く保存されていた。同じ部分はヒトのcーmaf遺伝子でも良く保存されていた。またcーDNAクローニングの結果からcーmaf遺伝子産物のアミノ末端がほぼ確定し、cーmaf遺伝子産物は約40kdの蛋白と推定されている。一方、ロイシンジッパー構造から予想される遺伝子産物の2量体形成の確認が難航している。現在ではmaf遺伝子産物はfos遺伝子産物と同様、他の蛋白質と2量体を形成する可能性も充分考えられる。maf遺伝子産物はおそらく2量体の形でDNAに結合すると考えられるので結合するDNA配列を決定し、支配下にある遺伝子を同定する上でこの点は極めて重要である。産物の核への局在を確認するためにもmaf遺伝子産物に特異的な抗体が必要であり、現在モノクローナル抗体の調製を急いでいる。またcーmaf遺伝子のプロモーターと思われる部分が同定され、その塩基配列からサイクリックAMPによるcーmaf遺伝子の発現制御の可能性が示唆され、この点も解析を急いでいる。
为了阐明V-MAF基因的结构和功能之间的关系,产生了具有部分缺失和点突变的突变基因,并将其掺入逆转录病毒载体中以感染细胞,并测试了细胞致癌性。总之,已经揭示了MAF基因产物的亮氨酸拉链结构特征和其氨基末端的碱性富含氨基酸的区域对于细胞致癌能力至关重要。此外,通过C-DNA克隆鉴定了两个相关的MAFB和MAFK,并确定了这些基因的亚结构,并且在V-MAF中最重要的部分是最重要的。同一部分在人C-MAF基因中保守。此外,C-MAF基因产物的氨基末端几乎可以从C-DNA克隆的结果中得到证实,并且估计C-MAF基因产物约为40 kd的蛋白质。另一方面,很难确认基因产物的二聚体的形成,这些二聚体是根据亮氨酸拉链结构预测的。如今,像FOS基因产物一样,MAF基因产物很有可能与其他蛋白质形成二聚体。由于MAF基因产物可能以二聚体的形式与DNA结合,因此这对于确定DNA序列以结合和识别控制下的基因非常重要。还需要针对MAF基因产物特异的抗体来确认该产物在细胞核中的定位,并且目前急切的单克隆抗体制备。此外,C-MAF基因的一部分似乎已被鉴定为启动子,其基本序列表明对C-MAF基因表达的循环AMP调控的可能性也被赶走了。

项目成果

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