癌遺伝子mafの関連遺伝子産胸による赤血球系転写因子NF-E2の機能変換

癌基因maf相关基因胸部产生对红系转录因子NF-E2的功能转换

基本信息

批准号：
06281203
负责人：
五十嵐和彦
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06281203/
关键词：
赤血球転写 maf NF-E2 mafK 赤白血病二量体

项目摘要

本研究では、赤血球系転写因子であるNF‐E2 p45の機能が、Maf関連蛋白質との会合によりどのように調節されるのか、並びに、赤血球分化におけるMaf関連蛋白質とp45の機能とその作用機作を明らかにすることを目的とした。本年度は以下の成果をあげた。1.小Maf群蛋白質のうち、MafKをコードするマウスcDNAを単離した。すでに報告されているニワトリMafKとのアミノ酸配列の比較から、機能上重要と考えられる領域が明らかになった。2.mafK遺伝子の発現様式の詳細な解析を、正常骨髄細胞とマウス胚を材料に用いて行った。その結果、mafK遺伝子は血球細胞の分化に加え、間葉系細胞と神経細胞の分化にも深く関与することが推察された。3.MafKとp45のcDNAを培養細胞内で発現させ、転写因子としての機能を解析した。その結果、MafKは単独では転写抑制因子として機能すること、そしてp45それ自体のDNA結合活性は非常に低いことが明らかになった。一方、MafKとp45とのヘテロ二重体(NF‐E2)は強くDNAに結合し、転写を活性化することも明らかになった。さらに、NF‐E2による転写活性化に必須の領域を、p45分子上に同定した。4.マウス赤白血病細胞株を用いて、mafK遺伝子を亜鉛依存性に過剰発現する細胞株を樹立した。この細胞の解析から、MafKは赤血球の分化を促進することが明らかになった。また、MafKとヘテロ二重体を形成する未知の蛋白質の存在が明らかになった。

在本研究中，我们研究了红系转录因子NF-E2 p45的功能如何通过其与Maf相关蛋白的关联来调节，以及Maf相关蛋白和p45在红系分化中的功能和机制。目的是为了澄清。今年，我们取得了以下成果。 1.分离了编码MafK（小Maf组蛋白之一）的小鼠cDNA。将其氨基酸序列与已报道的鸡 MafK 的氨基酸序列进行比较，揭示了被认为具有重要功能的区域。 2.利用正常骨髓细胞和小鼠胚胎对mafK基因的表达模式进行了详细分析。由此推断，mafK基因除了参与血细胞的分化外，还深度参与间充质细胞和神经细胞的分化。 3.我们在培养细胞中表达了MafK和p45的cDNA，并分析了它们作为转录因子的功能。结果表明，MafK 单独发挥转录抑制因子的作用，而 p45 本身具有非常低的 DNA 结合活性。另一方面，还发现MafK和p45（NF-E2）的异源双链体与DNA强烈结合并激活转录。此外，我们还确定了 p45 分子上的一个区域，该区域对于 NF-E2 的转录激活至关重要。 4.利用小鼠红白血病细胞系，我们建立了一种以锌依赖性方式过表达mafK基因的细胞系。对这些细胞的分析表明，MafK 促进红细胞分化。此外，还揭示了一种与 MafK 形成异源双链体的未知蛋白质的存在。