新しい赤血球特異的転写因子ECHとMaf関連蛋白質との会合による転写制御

新的红细胞特异性转录因子 ECH 与 Maf 相关蛋白关联的转录调控

基本信息

批准号：
07780590
负责人：
五十嵐和彦
金额：
$ 0.64万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780590/
关键词：
赤血球 ECH NFE2 maf 転写因子 bZip

项目摘要

bZip構造を有する転写因子ECHは、小Maf群蛋白質とのヘテロ二量体として赤血球特異的遺伝子の調節領域に存在する配列(TGCTGAGTCAT;以下NF-E2配列と称す)に結合する。本研究は、ECHによる転写活性化の分子機構と赤血球分化過程におけるECHの機能を明らかにすることを目的とした。本年度は以下の成果を得た。1.ECHは他の動物由来転写因子には類を見ない非常に強い転写活性化能を有することが、培養細胞への遺伝子導入実験から明らかになった。そこで種々の欠失変異をcDNA上で作製し、この強い転写活性化能を担う領域を固定した。その結果、ECHのアミノ末端側の二つの領域に転写活性化能を担う領域が局在することが明らかになった。この領域は酸性アミノ酸に富むが、この性状に加え他の構造上の特徴もその強い転写活性化能に重要である可能性が考えられた。2.種々の変異ECHの機能解析実験から、ECHの強い転写活性化能を負に制御する領域が、転写活性化ドメインやbZipドメインとは独立して存在することが明らかになった。赤芽球系細胞を用いた遺伝子導入実験において、この領域を欠失することによりECHの活性は増強すること、そしてこの領域のみを野性型ECHと共発現することにより、ECHによる転写活性化はトランスに増強されることを観察した。したがって、この領域は他の因子と結合することによりECHの転写活性化能を抑制することが示唆された。このような機能調節系は、外来性シグナルに対する反応性をこの転写因子に付与するものと考えられる。3.試験管内での赤芽球分化誘導系を用いて、赤芽球分化に伴うECHの発現動態を検証した。その結果、赤芽球分化に際してECHの発現は強く誘導されることが明らかになった。このことは、ECHが赤血球分化過程の調節に関与することを強く示唆する。

具有BZIP结构的转录因子ECH与序列（TGCTGAGTCAT；以下称为NF-E2序列）结合，存在于红细胞特异性基因的调节区域中，作为具有小MAF组蛋白的异源二聚体。这项研究旨在阐明ECH的转录激活的分子机制以及在红细胞分化过程中ECH的功能。今年，我们获得了以下结果：1。对基因转移到培养细胞的实验表明，与其他动物衍生的转录因子不同，ECH具有非常强大的转录激活能力。因此，在cDNA上产生了各种缺失突变，并固定了负责这种强大转录激活能力的区域。结果，揭示了ECH氨基末端的两个区域位于负责转录激活的区域。尽管该区域富含酸性氨基酸，但人们认为除了该特性，其他结构特征对于其强大的转录激活能力可能很重要。 2。对各种突变ECHS的功能分析表明，对ECH强烈调节强大转录激活能力的区域独立于转录激活域和BZIP结构域存在。在使用红细胞细胞的基因转移实验中，我们观察到该区域的缺失增强了ECH的活性，并且通过仅通过与野生型ECH共同表达该区域来增强ECH的转录激活。因此，建议该区域通过与其他因素结合来抑制ECH的转录激活能力。据信这种功能调节系统可以赋予对此转录因子的外国信号的反应。 3。使用在体外诱导红细胞分化的系统，验证了与红细胞分化相关的ECH的表达动力学。结果表明，在红细胞分化过程中，ECH表达强烈诱导。这强烈表明ECH参与调节红细胞分化过程。