腫瘍マ-カ-としてのMnース-パ-オキサイドディスムタ-ゼの癌化による発現機構

癌变过程中锰过氧化物歧化酶作为肿瘤标志物的表达机制

• 批准号: 03258224
• 负责人: 谷口 直之
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03258224/
• 关键词: MnーSOD; 上皮性卵巣癌; TNF; ILー1; カルボ-ルエステル; プロテインキナ-ゼーC

活性酸素は生体内で蛋白質や脂質の過酸化反応やDNAの損傷を起こして発癌に至らせると考えられる。また、我々が既に報告してきたように、このMnーSODは上皮性卵巣癌の良い腫瘍マ-カ-となる。今回は、ヒト及びラットMnーSODに特異な抗体を作製し、これを用いて血清中及び組織中のMnーSODを定量した。その結果、ムチン性嚢胞腺癌に比して、しょう液性腺癌組織ではMnーSODの増加が認められた。次に、卵巣癌のモデル動物としてラットの卵巣に発癌物質により卵巣腫瘍を形成させ、この腫瘍細胞におけるMnーSODの発現を調べた。その結果、癌細胞ではMnーSOD蛋白質及びmRNAの発現が増加していた。またTNFやILー1といったサイトカインがMnーSODの誘導を起こすことが知られている。そこでHeLa細胞を様々な薬物で刺激した結果、TNF,ILー1に加えホルボ-ルエステル(TPA)もまたMnーSODの発現を誘導することが明らかとなった。これらの刺激による誘導はTNF耐性細胞においてのみ見られた。次にTPAで前処理することによってプロテインキナ-ゼーC(PKーC)がダウンレギュレ-トされた細胞に対してTNFの効果を調べた。TNFはこの様な細胞においても強い誘導効果を示し、処理していない細胞に対して約2倍の増強が認められた。従ってTNFはRKーCを介しない別の経路を活性化すること、その際にTPA処理の間に合成される蛋白質因子が関与することが示唆された。MnーSOD遺伝子の発現がどのように調節されているのか、より明確にする為にはMnーSOD遺伝子そのものの解析と結合蛋白質について検討が必要である。我々は既にヒトMnーSOD遺伝子をクロ-ン化し5'調節部位について塩基配列を決定した。現在この得られたクロ-ンについてプロモ-タ-領域の解析を進めている。

活跃的氧气被认为会导致蛋白质和脂质的过氧化物反应以及对活体中DNA的损害，从而导致癌症。而且，正如我们已经报道的那样，该MN-SOD是肿瘤MA，具有良好的上皮卵巢癌。这次，定量了人类和大鼠Mn -sod和血清和组织中的Mn -Sod产生独特的抗体。结果，与粘蛋白囊性腺癌相比，观察到与土壤相关腺癌中Mn -SOD的增加。接下来，在大鼠的卵巢上形成了卵巢肿瘤，作为具有致癌物质的卵巢癌模型动物，并检查了Mn -SOD在该肿瘤细胞中的表达。结果，癌细胞中Mn -SOD蛋白和mRNA的表达增加。众所周知，诸如TNF和IL -1等细胞因子会导致Mn -SOD引导。由于用各种药物刺激HeLa细胞，很明显，Holvo-Leester（TPA）除TNF，IL-1外还诱导了MN-SOD的表达。由于这些刺激引起的引导仅在TNF耐药细胞中发现。接下来，检查了TNF的效果，其中通过假装与TPA进行处理，在其中蛋白质基纳-Zei C（PK-C）下降。 TNF在此类细胞中还显示出强大的引导效应，并且已被大约两倍的批准，因为尚未治疗的细胞增加。因此，建议TNF激活另一种不通过RK -C的途径，并且涉及TPA处理之间合成的蛋白质因子。为了阐明如何调整Mn -SOD基因的表达，有必要检查Mn -Sod基因本身的分析和结合蛋白。我们已经哭了人类MN-SOD基因，并确定了5'调整位点的基础序列。我们目前正在分析该促销区域的黑色。

项目成果

Ono,M.: "Elevated level of serum Mnーsuperoxide dismutase in patients with primary biliary cirrhosisーinvolvement of free radicals in the pathogenesis in primary biliary cirrhosis." J.Lab.Clin.Med.118. 476-483 (1991)

Ono, M.：“原发性胆汁性肝硬化患者血清锰超氧化物歧化酶水平升高——自由基参与原发性胆汁性肝硬化的发病机制。”J.Lab.Clin.Med.118 (1991)。

Kawamura,N.: "High levels of Mnーsuperoxide dismutase in serum of patients with neuroblstoma and in human neuroblastoma cell lines." Free Rad.Biol.Med.12. (1992)

Kawamura, N.：“神经母细胞瘤患者血清和人神经母细胞瘤细胞系中锰超氧化物歧化酶水平较高。”Free Rad.Biol.Med.12。

Taniguchi,N.: "Clinical significances of superoxide dismutase:Changes in aging,diabetes,ischemia and cancer." Advance in Clinical Chemistry. 29. (1992)

Taniguchi, N.：“超氧化物歧化酶的临床意义：衰老、糖尿病、缺血和癌症的变化。”

Deutsch,H.F.: "Preparation of human manganese superoxide dismutase by TriーPhase partitioning and preliminary crystallographic data." J.Mol.Biol.219. 103-108 (1991)

Deutsch, H.F.：“通过三相分配和初步晶体学数据制备人锰超氧化物歧化酶。”J.Mol.Biol.219 (1991)。

Kobayashi,T.: "Superoxide dismutase in psoriasis,squamous cell carcinoma and basal cell epithelioma:an immunohistochemical study." British J.Dermatology. 124. 555-559 (1991)

Kobayashi,T.：“牛皮癣、鳞状细胞癌和基底细胞上皮瘤中的超氧化物歧化酶：一项免疫组织化学研究。”