ユビキチンシステムによる細胞周期制御

泛素系统对细胞周期的控制

基本信息

批准号：
05269223
负责人：
山尾文明
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウス培養細胞系でのユビキチン活性化酵素(E1)の変異株を多数分離し、その遺伝学的解析と、同時に分離したE1cDNAを用い、ユビキチン化と細胞周期の調節の関わりを解析してきた。その結果、ユビキチン活性化酵素E1の遺伝的欠損がG2期進行阻害を引き起こし、染色体凝縮を抑制していると言う従来の観察に加え、DNA合成期の開始と進行においても著しくその機能が阻害されること、G1/S期の進行にもユビキチン系が関与することがわかった。これらに関わることとして、(1)DNA合成期に特異的にE1との反応性の上昇するE2分子種を同定し、その遺伝子の分離を行うための蛋白精製を行いほぼ成功した。(2)活性化酵素E1の特定部位がCDKキナーゼによりリン酸化されていることを示した(投稿準備中)。マウスE1酵素のSer4残基は細胞内でCDC2キナーゼによりリン酸化され、この部位の変異はG2期進行阻害を引き起こすように見える。これは、従来観察されていたCDC2の変異によるG2ブロックとユビキチン系(E1)の変異によるG2ブロックが独立乃至並列の事象ではないこと、細胞周期に依存したE1のリン酸化が、G2期進行に特異的なE2の認識とそれによる特定のユビキチン経路を起動してその進行の制御に関わっている可能性を強く示唆する。他方、Ser835残基は少なくともin vitroでCDC2キナーゼによりリン酸化され、この部位の変異はG1/S期進行阻害を引き起こすと思われることから、細胞内ではCDK2によるリン酸化を受けているのではないかと想像される。これらのことは、細胞周期制御におけるCDK系とユビキチン系の連動を強く示唆している。

我们已经在小鼠培养的细胞系中分离了许多泛素激活酶（E1）的突变体，并使用遗传分析和同时分离的E1CDNA分析了泛素化与细胞周期调节之间的关系。结果，除了传统的观察结果，即泛素激活酶E1的遗传缺乏会导致G2相的抑制并抑制染色体凝结，还发现其功能在DNA合成相的启动和进展过程中也显着抑制了ubiquitin System g1/g1/s的进展。这些参与包括（1）识别在DNA合成阶段特有反应性增加的E2分子物种，并进行了蛋白质纯化以分离基因并几乎成功。（2）结果表明，活化酶E1的特定位点被CDK激酶磷酸化（为发布准备）。小鼠E1酶的Ser4残基被Cdc2激酶细胞内磷酸化，并且该位点的突变似乎会导致G2相进展的抑制作用。这强烈表明，由于cdc2突变和由于泛素系统（E1）突变引起的G2块和G2块引起的G2块并非独立或平行事件，并且E1的细胞周期磷酸化可能与E2相关的E2相关识别G2相位的识别以及在此特定于G2阶段的识别以及在此特异性的ubiquiquiquintheption contection和ubiquiquiquiquiquiquiquin的前进。另一方面，至少在体外，Ser835残基被Cdc2激酶磷酸化，并且该位点的突变似乎会抑制G1/s相进展，从而可以想象它在细胞内被CDK2磷酸化。这些强烈表明在细胞周期调节中，CDK系统与泛素系统之间的联系。