tRNAと相同性を持つ散在性反復配列(SINE)の増幅機構の解析
与tRNA同源的散布重复序列(SINE)的扩增机制分析
基本信息
- 批准号:05265214
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
我々はタバコの染色体DNA上からクローニングしたSINEであるTS familyをタバコと同じ双子葉植物であるが染色体上にTS familyを持たないArabidopsis thalianaの染色体に導入した場合にArabidopsis植物体内でTS familyの増幅が起こるか否かを検討してきた。そのために、すでにin vitroでは転写されることがわかっているクローンを含む合計3つのTS familyのクローンをAgrobacterium tumefaciensを介してArabidopsis thalianaの染色体DNA上に導入し、染色体DNA上にTS familyを持つ形質転換植物を合計16系統作成した。これらの植物内でTS familyの転移が起こっているか否かをサザンハイブリダイゼーションおよびサザンハイブリダイゼーションよりもさらに高感度なインバースPCR法によって調べたが、いずれの形質転換植物体においてもTS familyの転移は検出されなかった。タバコや、イネにおいて内在性のレトロポゾンが植物細胞をカルス化させることが報告されているので、さらに一系統の形質転換植物については、自家受粉して得られた第2代の植物の一部の根をカルス化しTS familyの転移が起こっているかをインバースPCR法によって調べた。しかし、この植物においてもTS familyの転移は検出されなかった。TS familyが転移するためにはそれに先だってTS family転写されなければならない。そこで、一系統の形質転換植物については、染色体DNA上に存在するTS familyが実際に転写されているかどうかをノザンブロット解析によって調べた。しかし、in vitroで転写されているTS familyを染色体上に導入したにもかかわらず、転写産物は検出されなかった。現在、TS familyの転写が、TS familyが存在する染色体上の位置に依存している可能性を考え、他の形質転換植物についてもTS familyが転写されているか否かを解析している。
我们与香烟是同一双叶植物,但在拟南芥染色体上没有TS家族,我一直在考虑是否发生。因此,在拟南芥染色体DNA上,总共引入了三个TS家族克隆,包括已经在体外转录的克隆。虽然TS家族的转移发生在这些植物中,这比南部杂交和南部杂交更敏感,但在任何转化的植物中也未检测到TS家族过渡。由于据报道,香烟中的内部性质的内部腹膜和大米已转化为植物细胞,因此通过授粉自授粉的植物获得了第二个代植物之一。逆PCR方法查看TS家族是否有转移。但是,在该植物中未检测到TS家族的转移。 TS家族必须转移到TS家族进行转移。因此,对于单个结构,NOZANBROT分析检查了是否存在于染色体DNA上的TS家族是否实际转移。然而,尽管引入了在染色体上在体外转移的TS家族,但仍未检测到转移产物。目前,TS家族转移的可能性取决于TS家族的染色体位置,并分析了TS家族是否已在其他特征中转录。
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Yasushi Yoshioka: "Molecular characterization of a short interspersed repetitive element from tobacco that exhibits sequence homology to specific tRNAs." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 6562-6566 (1993)
Yasushi Yoshioka:“来自烟草的短散布重复元件的分子表征,该元件与特定 tRNA 表现出序列同源性。”
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