ジーントラップライブラリーを用いた維管束細胞の分化に関与する遺伝子変異体の分離

使用基因陷阱文库分离参与血管细胞分化的基因变体

基本信息

批准号：
10780458
负责人：
吉岡泰
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780458/
关键词：
ジーントラップシロイヌナズナ維管束組織

项目摘要

染色体DNA上にレポーター遺伝子としてのβーグルクロニダーゼ(GUS)をもつ16,000系統分の形質転換シロイヌナズナの種子を作製し、973系統について播種後約2週間目の植物体全体をGUS染色した。その結果、子葉、本葉、根の先端、托葉などの植物体のいずれかの場所でGUS活性が検出された系統が20系統得られた。これら20系統の中で、維管束で特に強いGUS活性が検出された系統が1系統得られた。E10と名付けたこの系統におけるGUS活性は、最初の本葉が展開し始める頃から胚軸、子葉葉柄、根の維管束で検出され始め、その後、子葉、本葉葉脈の維管束で特に強いGUS活性が検出された。抽苔後では茎生葉の葉脈、花弁とがく全体、柱頭、トリコームにおいてGUS活性が検出された。トラップされた遺伝子をホモに持つ個体において、葉の組織切片を作製して光学顕微鏡によって維管束を観察したが野生型と比べて形態的な異常は見られなかった。遺伝子クローニングの結果、E10系統においてトラップされている遺伝子は、シロイヌナズナのリジン感受性のアスパラギン酸キナーゼの一つと87%のアミノ酸の類似性を示すタンパク質をコードしており、これからE10系統においてはリジン感受性アスパラギン酸キナーゼがトラップされていると考えられた。シロイヌナズナではE10系統から得られた物以外に、すでに2種類のリジン感受性アスパラギン酸キナーゼ遺伝子が報告されており、E10系統においてトラップされた遺伝子をホモに持つ個体で目に見える形態的な異常が表れなかったのは遺伝子がredundantであったためと考えられた。

制备了16,000型型硅藻纳祖那种子，该种子在染色体DNA上具有β-糖酶（GUS）为记者基因，并在973系统播种后大约将整个植物体染成大约2周。结果，有20个系统，在任何植物中都检测到GUS活性，例如儿童叶，叶子，根和景观。在这20个系统中，在容器束中检测到一个具有特别强大的GUS活性的系统。该系统中的GUS活性开始在牡蛎轴，出血模式和根部的根中检测到，然后检测到充满活力的自助餐中的主叶容器。在苔藓之后，在茎，花瓣和技巧的叶子中检测到GUS活性。在持有植物中捕获基因的个体中，制备了叶片组织，并通过光学显微镜观察到圆柱体，但与野生型相比，没有看到异常形式。由于遗传克隆的结果，被困在E10系统中的基因是一种蛋白质，它显示了87％氨基酸的相似性，作为lizin敏感天质敏感天质天敏含有含有蜥蜴蛋白敏感的lizen敏感的敏感的天冬氨酸 - 敏感的天冬氨酸敏感的天素敏感的香菜酸，现在，E10系统是一种赖氨酸敏感的天冬酸酯。除了从E10系统中获得的一种，在Sirini Nazuna中已经报道了两种类型的赖氨酸敏感的天质酸基因，并且同性恋中可见的形态异常具有可见的形态异常该基因是多余的。