血管平滑筋及び内皮に発現する新しいG蛋白質共役型受容体の機能の解析

血管平滑肌和内皮表达的新型G蛋白偶联受体的功能分析

基本信息

  • 批准号:
    05256211
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1993
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1993 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

G蛋白共役型受容体スーパーファミリーの中で比較的保存性の高い第3及び6膜貫通領域をコードするオリゴヌクレオチドプライマーを用いたPCR、大動脈平滑筋細胞cDNAライブラリーのハイブリダイゼーションスクリーニングにより新しいG蛋白共役型受容体をコードすると考えられるcDNAクローン(AGR16と命名)をクローニングした。AGR16は352アミノ酸からなる蛋白をコードし、細胞膜貫通領域を構成すると考えられる7個の疎水性領域を有する。ノーザンブロット解析によりAGR16遺伝子は心、肺、大動脈及び消化管に発現していることが明らかになった。コンピューターによるホモロジー検索の結果、AGR16と約50%のアミノ酸配列の相同性を有する受容体cDNAクローン(EDG-1)がヒトさい帯血管内皮細胞に発現していることが分かった。そこで次にラットEDG-1のcDNAクローニングを試みた。まず、PCR法によりヒトさい帯血管内皮cDNAより、ヒトEDG-1 cDNAの部分クローンを得、これをプローブとして用いラット肺cDNAライブラリーをスクリーニングし、ラットEDG-1の全長をコードするクローン(rEDG-1)を得た。rEDG-1は383アミノ酸からなる蛋白をコードし、G蛋白共役型受容体の特徴を有する。rEDG-1は脳、心、肺、消化管、副腎に発現する。培養細胞を用いた検討ではAGR16は大動脈平滑筋、心筋細胞に、EDG-1は静脈内皮、大動脈平滑筋、心筋細胞に発現していることがみいだされた。AGR16、rEDG-1、cDNAをCOS-7、Ltk^-細胞に発現させ、種々の生理活性物質に対するサイクリックAMP、イノシトールリン酸の反応を調べた。しかし、現在のところAGR16、rEDG-1受容体を活性化するリガンドをみいだしていない。
使用编码第三和第六跨膜区的寡核苷酸引物进行PCR,并通过杂交筛选主动脉平滑肌细胞cDNA克隆(命名为AGR16)发现了新的G蛋白,该寡核苷酸引物在G蛋白偶联受体超家族中相对高度保守。 )被认为编码缀合受体被克隆。 AGR16 编码由 352 个氨基酸组成的蛋白质,并具有七个疏水区域,这些区域被认为构成细胞跨膜区域。 Northern印迹分析显示AGR16基因在心脏、肺、主动脉和胃肠道中表达。使用计算机进行同源性搜索发现,在人脐血管内皮细胞中表达了与AGR16具有约50%氨基酸序列同源性的受体cDNA克隆(EDG-1)。因此,我们接下来尝试了大鼠 EDG-1 的 cDNA 克隆。首先,通过PCR方法从人脐血管内皮cDNA中获得人EDG-1 cDNA的部分克隆,并将其作为探针筛选大鼠肺cDNA文库。编码大鼠EDG-1全长的克隆( rEDG-我得到了 1)。 rEDG-1编码由383个氨基酸组成的蛋白质,具有G蛋白偶联受体的特征。 rEDG-1 在脑、心脏、肺、胃肠道和肾上腺中表达。在使用培养细胞的研究中,发现AGR16在主动脉平滑肌和心肌细胞中表达,EDG-1在静脉内皮、主动脉平滑肌和心肌细胞中表达。在COS-7和Ltk^-细胞中表达AGR16、rEDG-1和cDNA,并研究环AMP和磷酸肌醇对各种生理活性物质的反应。然而,迄今为止尚未发现激活AGR16和rEDG-1受体的配体。

项目成果

期刊论文数量(10)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hiroshi Okazaki: "Molecular cloning of a novel putative G protein-coupled receptor expressed in the cardiovascular system" Biochemical and Biophysical Research Communications. 190. 1104-1109 (1993)
Hiroshi Okazaki:“在心血管系统中表达的新型推定 G 蛋白偶联受体的分子克隆”《生物化学和生物物理研究通讯》。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yoh Takuwa: "Alterations in protein kinase C activity and membrane lipid metsbolism in cerebral vasospasm after sulrcrachnvid hemorrhagl" Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13. 409-415 (1993)
Yoh Takuwa:“颅内出血后脑血管痉挛中蛋白激酶 C 活性和膜脂代谢的改变”《脑血流与代谢杂志》。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yoh Takuwa: "Endothelin in vascular and endocrine systems:biological activities and its mechanisms of action" Endocrine Journal. 40. 489-506 (1993)
Yoh Takuwa:“血管和内分泌系统中的内皮素:生物活性及其作用机制”内分泌杂志。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Wei Zhou: "Protein kinase C-mediated bidirectional regulation of DNA synthesis,RB protein phosphorylation,and cyclin-dependent kinases in human vaseular endothelid cells" Journal of Biological Chemistry. 268. 23041-23048 (1993)
周伟:“蛋白激酶C介导的人血管内皮细胞DNA合成、RB蛋白磷酸化和细胞周期蛋白依赖性激酶的双向调节”《生物化学杂志》。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Takao Asano: "Cellular membrane A key to disease Processes" CRC Press Editers:Tsuyoshi Ohnishi,Tomoko Ohnishi, 412 (1993)
Takao Asano:“细胞膜是疾病过程的关键”CRC Press 编辑:Tsuyoshi Ohnishi、Tomoko Ohnishi,412 (1993)
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多久和 陽其他文献

マウス分娩時の子宮機能におけるADAMTS-1の役割の解析
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 作者:
    生水 真紀夫;多久和 陽;岡本 安雄;栗原 裕基;松島 綱治;久野耕司
  • 通讯作者:
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抗がん剤による臓器障害におけるスフィンゴシン-1-リン酸(S1P)情報伝達系の関与
1-磷酸鞘氨醇(S1P)信号系统参与抗癌药物引起的器官损伤
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 作者:
    多久和 典子;石丸 和宏;岡本 安雄;多久和 陽
  • 通讯作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
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  • 作者:
    安藝 翔;吉岡 和晃;岡本 安雄;多久和 典子;多久和 陽
  • 通讯作者:
    多久和 陽
RAGE control of diabetic neuropathy in a mouse model:effects of RAGE gene disutuption and administration of low-molecular weight heparin
RAGE 对小鼠糖尿病神经病变模型的控制:RAGE 基因破坏和低分子肝素给药的影响
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
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  • 作者:
    Nozaki;I.;et. al.;多久和 陽;Myint K.M.
  • 通讯作者:
    Myint K.M.
クラスII α型PI3K-C2αはエンドソーム上でのTGFβ/Smad2/3 シグナリングに必須である
II 类 α 型 PI3K-C2α 对于内体上的 TGFβ/Smad2/3 信号转导至关重要
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
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  • 作者:
    安藝 翔;吉岡和晃;岡本安雄;多久和 典子;多久和 陽
  • 通讯作者:
    多久和 陽

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知道了