血管内皮の生産する生理活性ペプチドエンドセリンー1の血管平滑筋作用機序の研究

血管内皮产生的生物活性肽内皮素1对血管平滑肌的作用机制研究

基本信息

批准号：
03268204
负责人：
多久和陽
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

エンドセリンー1(ET)は、近年見い出された血管内皮の産生する生理活性物質であり、cDNAクロ-ニングにより全構造が明らかにされた。ETー1は新しい循環調節因子としてその機能が注目されている。冠動脈平滑筋を用いたこれまでの検討で、ETー1は、L型Caチャンネルの活性化とフォスホリパ-ゼC(PLC)の活性化を引き起こすことが明らかにされている。しかしtransmembrane signaling以降の収縮機構機序は現在までのところ、充分な検討が成されていない。本研究では冠動脈平滑筋を用いてETー1のトランスメンブラン情報伝達系以降の作用機構、特にCa依存性20KDaミオシン軽鎖リン酸化及びアクチンフィラメント側制御に関与すると考えられるカルデスモンリン酸化を検討した。張力はETー1投与後除々に増大し約10分後にプラト-に達した。MLCリン酸化レベルも除々に増大し、張力に先行して約5分後にプラト-に達し60分間にわたり高値を持続した。これとは対象的にKCl、ヒスタミで刺激した場合には、張力、MLCリン酸化の立ち上がりが速く1分以内に頂値に達した。ETー1投与5分後にはCDリン酸化レベルの変化は見られなかったが60分後には増加が見られた。ホルボ-ルエステル投与60分後にもCDリン酸化レベルの増加が見られた。KClはCDリン酸化に影響しなかった。ニトログリンセリンはETによる収縮を抑制した。弛緩に伴いMLCリン酸化レベルは刺激前値にまで低下したがCDリン酸化レベルは低下しなかった。以上の結果はブタ冠動脈平滑筋のET収縮におけるMLSリン酸化の重要性を示唆する。

内皮素-1（ET）是一种由血管内皮产生的生理活性物质，近年来已经发现，cDNA克隆揭示了其整个结构。 ET-1因其作为新的循环调节器的功能引起人们的注意。先前使用冠状动脉肌肉的研究表明，ET-1引起L型Ca通道和磷脂酶C（PLC）的激活。然而，迄今为止，跨膜信号传导后收缩机制的机制尚未得到彻底研究。在这项研究中，我们研究了跨膜信号传导系统（尤其是CA依赖性20KDA肌球蛋白轻链磷酸化和Caldesmon磷酸化）后ET-1的作用机理，这被认为与使用冠状平滑肌有关肌动蛋白丝侧的调节。 ET-1给药并到达柏拉图后，张力逐渐增加 - 大约10分钟。 MLC磷酸化水平也逐渐增加，达到柏拉图 - 大约在紧张张力前5分钟，并且持续60分钟。这是因为，当用KCL或Histami刺激时，张力和MLC磷酸化迅速上升，在1分钟内达到顶点。 ET-1给药后未观察到CD磷酸化水平的变化，但是在60分钟后观察到增加。在给药后60分钟后，CD磷酸化水平也增加了。 KCL对CD磷酸化没有影响。硝基溶解酶抑制了ET引起的收缩。随着松弛，MLC磷酸化水平降低到预刺激值，但CD磷酸化水平并未降低。以上结果表明MLS磷酸化在ET收缩中的重要性在猪冠状动脉平滑肌中。