遅発型副腎過形成症の分子遺伝学的解析

迟发性肾上腺皮质增生症的分子遗传学分析

基本信息

批准号：
06670757
负责人：
藤枝憲二
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は先天性副腎過形成症のうち日本人に比較的多くみられる21水酸化酵素(P450c21)欠損症及び3βhydroxysteroid dehydrogenase(3β-HSD)欠損症における症状の異質性、すなわち古典型と遅発型両症の成因について分子遺伝学的解析を行い、その分子遺伝学的相違点を明かにすること。また遅発型21水酸化酵素欠損症の遺伝子頻度を明かにするため新生児マスクリーニングでえられた漉紙血を用いた簡便な遺伝子変異同定法を確立することを目的とした。遅発型P450c21欠損症の遺伝子解析により第1,第4Exonの変異をもつcompoud heterogygoteが日本人に多くみられ、欧米で高頻度でみられる第7Exonの変異は認められないことを明かとした。古典型での我々の解析結果と併せ考えると、P450c21欠損症にみられる古典型と遅発型との症状の違いはそのP450c21遺伝子変異に基づく酵素障害の程度の違いにより説明しうることを明きらかにした。さらに遅発型P450c21欠損症は新生児マススクリーニングによっても発見しうることを明きらかにした。一方3β-HSD欠損症においては、その古典型5例の解析にてType-II3β-HSD遺伝子の第4Exon,第3Exonの部位に終止コドン、あるいはミスセンス変異の存在を全例認めたが、遅発型5例においてはType-II3β-HSD遺伝子には異常は同定しえなかった。このことは3β-HSD欠損症はP450c21欠損症とは異なり、古典型と遅発型とはその成因が異なり、古典型はType-II3β-HSD遺伝子の遺伝的異常によって起こり、遅発型はType-II3β-HSD遺伝子以外の要因によって発症することが示唆された。漉紙血を用いた簡便なP450c21遺伝子変異同定法としてミスマッチ法を用いた方法を確立し、現在Intron2,Exon4IN,E7VL,E8nonの4種類の変異を同定しえるようになっている。

本研究调查了日本人群中相对常见的先天性肾上腺增生症、21-羟化酶（P450c21）缺乏症和3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）缺乏症的症状异质性，以对其病因进行分子遗传学分析。两种类型并阐明分子遗传差异。我们还旨在建立一种简单的方法，使用新生儿大规模筛查期间获得的血液样本来识别基因突变，以明确迟发性 21-羟化酶缺乏症的基因频率。晚发性P450c21缺陷症的遗传分析显示，日本人中常见第1和第4外显子突变的复合异型体，而在欧美常见的第7外显子突变却未观察到。结合我们对经典型的分析结果，很明显，P450c21 缺乏症的经典型和晚发型之间的症状差异可以通过 P450c21 引起的酶紊乱程度的差异来解释。基因突变。此外，我们发现晚发性 P450c21 缺陷也可以通过新生儿大规模筛查来检测。另一方面，在3β-HSD缺陷的情况下，对5例经典3β-HSD病例的分析表明，所有病例在II型3β-HSD的第4和第3外显子位点均存在终止密码子或错义突变。基因，但发病较晚在5型病例中，II3β-HSD基因未发现异常。这说明3β-HSD缺乏症与P450c21缺乏症不同，经典型和迟发型的病因不同；经典型是由Type-II3β-HSD基因的遗传异常引起的，而迟发型是由Type-II3β-HSD基因的遗传异常引起的。由-II3β-HSD引起的推测是由HSD基因以外的因素引起的。我们建立了错配法作为使用纸巾识别P450c21基因突变的简单方法，目前能够识别四种类型的突变：Intron2、Exon4IN、E7VL和E8non。