妖精症をモデルとした子宮内発育不全発症機序に関する分子生物学的研究

以鲫鱼为模型进行宫内生长受限发病机制的分子生物学研究

基本信息

批准号：
05670648
负责人：
藤枝憲二
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

子宮内発育不全、体脂肪の減少、高度のインスリン抵抗性を示す症候群であるLeprechaunism(妖精症)をモデルとして子宮内発育不全症におけるインスリン関連因子の役割についてin vivo,in vitroの面から検討を加えた。インスリン受容体遺伝子の解析及びその異常遺伝子の発現実験にて本症の受容体遺伝子異常として新しい遺伝子変異を同定した。すなわち母親由来のalleleにおいてExon5の一部を含む領域に約1.5kbの欠失を認め、mRNA量も約70%に減少していた。父親由来のalleleではコドン87のLeu(CTG)がPro(CCG)に置換する点突然変異を認めた。NIH3T3細胞に両異常遺伝子を発現させたところインスリン結合能の低下、受容体蛋白の細胞内輸送の障害がみられた。父親由来の受容体遺伝子変異は受容体蛋白のインスリン結合部位に一致し、この部位の構造変化によりインスリン結合の低下が引き起こされたものと推測された。皮膚繊維芽細胞を用いたインスリン及びIGF-Iの結合能、細胞数、Thymidine,AIB,Glucoseの取り込みを指標としたインスリン、IGF-Iの作用機構を検討したところ、インスリン結合能は低下していたが、IGF-I結合能は正常児由来細胞と同等の結合能を有していた。また細胞数増加、Thymidine,AIB,Glucoseの取り込みを指標としたインスリン作用は低下していたが、IGF-Iは正常と同等の作用を示した。In vivoでのIGF-I治療により患児の代謝動態は良好にコントロールされており、また発育も順調である。以上のin vivo,in vitroの結果は本症においてインスリンレセプターを介する情報伝達系には異常がみられるがIGF-Iレセプターを介する情報伝達系は正常に作動していること、また子宮内発育不全の原因としてインスリンレセプター異常が関与していることが示された。

我们使用妖精（一种综合征，显示出宫内内生长稳定性，体力下降和高胰岛素耐药性），我们研究了与体内和体外的胰岛素相关因子在宫内内生长稳定性中的作用。在分析胰岛素受体基因和异常基因表达的实验中，新的基因突变被确定为该疾病中的受体基因异常。也就是说，在母亲的等位基因中，在包含Exon5的一部分区域中观察到约1.5 kb的缺失，mRNA的量减少到约70％。在等位基因中，观察到一个点突变，其中密码子87 LEU（CTG）被Pro（CCG）取代。在NIH3T3细胞中表达两个异常基因的胰岛素结合能力和受体蛋白内细胞内转运的损害的降低。父源的受体基因突变与受体蛋白的胰岛素结合位点一致，据估计，该位点的结构变化导致胰岛素结合的降低。当我们使用皮肤成纤维细胞研究胰岛素和IGF-1的结合能力时，细胞计数以及使用胸苷，AIB和葡萄糖摄取指数的胰岛素和IGF-I的作用机理，胰岛素结合能力降低了IGF-I与该细胞的结合能力相比，胰岛素结合能力降低了。此外，尽管使用细胞计数的增加和胸苷，AIB和葡萄糖作为指标，胰岛素作用降低了，但IGF-I显示出与正常情况相似的作用。 IGF-1在体内治疗已成功控制了患者的代谢动力学，并且进展也不错。上述体内和体外结果表明，在这种情况下，胰岛素受体介导的信号传导系统异常，但是IGF-I受体介导的信号系统正在正常工作，并且异常胰岛素受体作为N炎的原因作为N经N内生长障碍的原因。