遺伝子改変動物を用いたコルチリンパのホメオスターシスに関する分子メカニズムの解析

利用转基因动物分析皮质淋巴稳态的分子机制

基本信息

批准号：
17659538
负责人：
池田勝久
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

難聴遺伝子の発見によって、これまで原因不明であった難聴の本質的な病因が明らかとなったが、発症機序の解明や根本的治療の確立にはヒトでは限界があり、遺伝性難聴の病態モデル動物の開発が必須と考えられている。コルチリンパの形成不全やコルチトンネンの虚脱は耳毒性薬物や音響障害などで誘導される現象として知られている。しかしながら、内耳の遺伝子の制御によるコルチリンパの恒常維持の研究は内外において皆無である。さらに、本研究で応用される・b2遺伝子はヒトの遺伝性難聴の原因として、最も高頻度であり、将来の根本的治療の理論的根拠となる新しい知見を提供することが期待できる。GJB2遺伝子変異によって生じる遺伝性難聴モデル動物として、優性阻害効果による優性遺伝マウスと条件付きノックアウトによる劣性遺伝マウスを検討した。慢性的阻害効果を持つ遺伝子変異を導入したトランスジエニックマウスの内耳には変異sib2mRNAが正常gjb2mRNAの3〜4倍発現していた。聴性脳幹反応(ABR)の測定を行うと、トランスジエニックアリル非発現マウスはいずれも35dB以下の閾値であるのに対し、トランスジエニックアリル発現マウスでは閾値が90dB以上に上昇していることが判った。組織学的検討では生後2週においてコルチ器の変性が、生後7週においてコルチ器の変性とラセン神経節の細胞密度低下を認めた。透過型電子顕微鏡では、コルチ器では、内外有毛細胞の変性が明らかで、支持細胞、特に柱細胞の変形によるコルチトンネルの消失が特徴的だった。それに対して、蝸牛外側壁のラセン靭帯の線維細胞、血管条には異常を認めなかった。

听力损失基因的发现揭示了听力损失的基本病因，以前尚不清楚，但疾病机制和在人类中建立基本治疗的机制有限制，人们认为，遗传性听力损失的模型动物的发展至关重要。皮质性发育不全和皮质隧道塌陷称为耳毒性药物和声学疾病引起的现象。然而，尚未通过调节内耳中基因的调节对皮质淋巴的稳态维持进行研究。此外，本研究中应用的B2基因是人类遗传性听力损失的最常见原因，可以期望提供新发现，以作为未来基本治疗的基础。由于有条件的抑制作用，由于有条件的敲除作为遗传性听力损失的动物模型，我们研究了主要的遗传遗传小鼠，这是由GJB2基因突变引起的。突变体SIB2 mRNA的表达比正常小鼠内耳的正常GJB2 mRNA多3-4倍，该差异小鼠的内耳被引入具有慢性抑制作用的基因突变。当测量听觉的脑干反应（ABR）时，发现在未表达易位烯丙基的小鼠中，阈值增加到90 dB或更多。组织学检查表明，在生命的2周时观察到皮尔蒂斯的变性，并且在生命的7周时，Cortis的变性和螺旋神经节的细胞密度降低。透射电子显微镜揭示了皮尔蒂机器中内部和外毛细胞的变性，其特征是由于支撑细胞（尤其是柱细胞）的变形而导致皮质隧道的消失。相反，在耳蜗侧壁的螺旋韧带的纤维细胞或纹状体中未观察到异常。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Effects of mutation in the conserved GTSRH equence of the Moter ProteinPrestin on Its Characteristics.

Moter ProteinPrestin 保守 GTSRH 序列突变对其特性的影响。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
JSME International J Series C 48
影响因子：
0
作者：
Kumano S;Iida K;Murakosh M;Naito N;Tsumoto K;Ikeda K;Kumagai I;Kobayashi T;Wada A*
通讯作者：
Wada A*