滑膜細胞の小胞体機能亢進症 -関節リウマチの新しい病態モデルの提唱に向けた研究-

滑膜细胞内质网功能亢进 - 旨在提出类风湿关节炎新病理模型的研究 -

基本信息

批准号：
17659304
负责人：
中島利博
金额：
$ 1.98万
依托单位：
St. Marianna University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

関節リウマチ(RA)の最も有効な治療ターゲットのひとつは滑膜細胞である。近年我々が報告したシノビオリンは、マウスでの強発現により滑膜増殖性の関節症をおこし、反対に発現抑制では滑膜のアポトーシスによるコラーゲン誘導性関節炎への抵抗性を示したため、シノビオリンは滑膜細胞の増殖促進作用と抗アポトーシス作用を有する分子であることをin vivoで証明した(Genes Dev 2003;17:2436)。シノビオリンは小胞体に局在するE3ユビキチンリガーゼであることから、その機能は小胞体内の不良蛋白(unfolded protein)の除去、すなわちERAD(Endoplasmic Reticulum Associated Degradation)であり、この分子が高発現しているRA滑膜細胞は"Hyper-ERAD"とも呼ぶべき不良蛋白除去能の亢進状態であると想定される。本研究は、「Hyper-ERADはRA滑膜細胞の新たな細胞学的特性」であるという概念にもとづきシノビオリンの機能解析を手掛かりに、新規RAの病態論の展開を試みた。その結果、下記の成果が得られた。(1)シノビオリン転写活性化には、プロモーター上のEBS(Ets binding site)がコアエレメントとなることを発見した。また、そのEBSデコイ核酸を用いてシノビオリンの発現を抑制することにより細胞増殖が抑制されることを証明した(Mol Cell Biol 2005;25:7344)。(2)シノビオリン遺伝子欠損マウスが胎仔肝でのアポトーシスの亢進による二次造血の異常・貧血を引き起こし13.5日齢までに致死となることを明らかとした(J Biol Chem 2005;280:7909)。さらにこの遺伝子欠損マウス由来胎仔線維芽細胞を用いて、基質探索を試みた結果、基質候補分子の同定に成功した(論文投稿中)。以上のように、シノビオリンはアポトーシスに広くかかわることが明らかとなり、また基質候補分子の同定により新たなRA治療の標的を見出すことに成功した。今後、これらの知見をもとに研究を進めることでRAの治療法の開発が期待できる。

类风湿性关节炎（RA）最有效的治疗靶点之一是滑膜细胞。近年来，我们报道了Synoviolin在小鼠体内强烈表达时会引起滑膜增生性关节病，另一方面，当其表达受到抑制时，它会因滑膜细胞凋亡而表现出对胶原蛋白诱导的关节炎的抵抗力。它是一种具有促进细胞增殖和抗凋亡作用的分子(Genes Dev 2003;17:2436)。滑膜蛋白是一种定位于内质网的E3泛素连接酶，因此其功能是去除内质网中的未折叠蛋白，或ERAD（内质网相关降解）。假设RA中存在的滑膜细胞处于一种状态。增强去除缺陷蛋白质的能力，也称为“Hyper-ERAD”。本研究试图以“Hyper-ERAD是RA滑膜细胞的一种新的细胞学特性”这一概念为基础，以synoviolin的功能分析为线索，发展RA的新病理学理论。结果，获得了以下结果。 (1)我们发现启动子上的EBS（Ets结合位点）是滑膜蛋白转录激活的核心元件。此外，已证明通过使用EBS诱饵核酸抑制滑膜增生蛋白表达来抑制细胞增殖(Mol Cell Biol 2005；25：7344)。 (2) Synoviolin基因缺陷小鼠由于胎儿肝脏细胞凋亡增强而出现继发性造血异常和贫血，导致13.5日龄时死亡(J Biol Chem 2005;280:7909)。此外，我们尝试使用来自该基因缺陷小鼠的胎儿成纤维细胞来寻找底物，结果，我们成功地鉴定了候选底物分子（目前正在提交论文）。如上所述，已经清楚Synoviolin广泛参与细胞凋亡，并且通过鉴定候选底物分子，我们成功地找到了RA治疗的新靶点。未来，希望基于这些发现的研究能够促进 RA 治疗方法的开发。