低分子量Gタンパク質Rabをゲノムワイドで網羅的に解析するツールの開発

开发低分子量 G 蛋白 Rab 的全面全基因组分析工具

• 批准号: 17657067
• 负责人: 福田 光則
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tohoku University (2006)The Institute of Physical and Chemical Research (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657067/
• 关键词: 低分子量G蛋白質; Rab; Rabエフェクター; 膜輸送; dominant active; dominant negative; ゲノムワイド; 網羅的解析

真核細胞生物の細胞内はさらに膜で包まれたオルガネラにより満たされており、主に膜輸送を介してオルガネラ同士で頻繁に物質のやり取りを行っている。低分子量Gタンパク質Rabファミリーは膜輸送に関与する分子群としては最大のもめで、哺乳動物においては約60種類ものアイソフォームが存在している。各々のRabは特定の膜輸送を制御すると考えられているが、12番以降のRabアイソフォームになるといつどこで何を運ぶのかに関してはほとんど解明されていない。Rabは活性化型固定化(domihant active, DA)変異体あるいは不活性化型固定化(dominant negative, DN)変異体を作成することが出来るため、特走の膜輸送に対する影響を検討することが可能であるが、ある種の受容体が未知のRabにより細胞膜に輸送される場合には、60種類全てのRabクローンに対してDA/DN変異体を作成する必要があり、60種類のうちどのRabが関与するのかを調べることはこれまで不可能であった。このため世界的にRabを綢羅的に解析するツールのニーズが高まってきている。そこで本研究ではマウス及びヒトに存在する60種類のRabを全てクローニングし、これらのRabの機能を網羅的に解析するツーノレ(「Rab bank」)を作成することを目指した。本年度は、これまでに作成したRabの網羅的廨析ツールを利用し、実際に内分泌細胞(PC12細胞)からのホルモン分泌に関わるRabのスクリーニングを行った。その結果、60種類のRabのうちPC12細胞のホルモン顆粒上にはRab3AとRab27Aの二種類のRabが存在し、お互いに協調的にホルモン顆粒の細胞膜へめ繋ぎ止めやホルモンの放出に関与することを明らかにすることができた(J. Cell Scl.(2006)119:2196-2203)。

真核生物的细胞进一步充满了膜包裹的细胞器，并且细胞器经常在它们之间（主要通过膜转运）交换物质。低分子量G蛋白Rab家族是参与膜转运的最大分子，哺乳动物中存在约60种同工型。尽管每个RAB都被认为可以控制特定的膜运输，但在第12号开始时，Rab同工型在何时何地将其携带，但几乎没有理解。 Rab可以产生活化或灭活的固定化（DA）或灭活的固定化（DN）突变体，因此可以研究对特殊区域的膜转运的影响，但是当某些受体被未知的RAB，DA/DN突变体传输到细胞膜时，必须为所有60种Rab Clones创建60种类型的RAB涉及的60种类型的RAB，这是不可能的。结果，越来越需要工具以在世界各地全面分析RAB。因此，在这项研究中，我们旨在克隆老鼠和人类中存在的所有60种类型的Rab，并创建一个两-rab bank（“ Rab bank”），以全面分析这些RAB的功能。今年，我们使用了迄今为止创建的综合RAB分析工具来筛选内分泌细胞（PC12细胞）激素分泌的RAB。结果，据透露，在PC12细胞的激素颗粒上存在60种类型的RAB，两种类型的Rabs，Rab3a和Rab27a，参与了将激素颗粒与激素释放和激素释放的合作连接（J. Cell Scl。（2006）119：2196-2203）。

项目成果

Neuronal calcium sensor-1 (NCS-1) and PI4Kβ stimulate ERK1/2 signaling by accelerating recycling through endocytic recycling compartment (ERC).

神经元钙传感器-1 (NCS-1) 和 PI4Kβ 通过内吞回收室 (ERC) 加速回收来刺激 ERK1/2 信号传导。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Mol. Biol. Cell 17
• 作者: Kapp-Barnea;Y.;Ninio-Many;L.;Hirschberg;K.;Fukuda;M.;Jeromin;A.;Sagi-Eisenberg;R.
• 通讯作者: R.

Functional analysis of Slac2-a/melaonophilin as a linker protein between Rab27A and myosin Va in melanosome transport.

Slac2-a/melaonophilin 作为 Rab27A 和肌球蛋白 Va 在黑素体运输中的连接蛋白的功能分析。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Methods Enzymol. 403
• 作者: Kuroda;T.S.;Itoh;T.;Fukuda M.
• 通讯作者: Fukuda M.

Protein kinase C-mediated phosphorylation of the two polybasic regions of synaptotagmin VI regulates their function in acrosomal exocytosis.

• DOI: 10.1016/j.ydbio.2005.07.007
• 发表时间: 2005-09
• 期刊: Developmental biology
• 影响因子: 2.7
• 作者: Carlos M. Roggero;C. Tomes;G. D. De Blas;Jimena Castillo;M. Michaut;M. Fukuda;L. Mayorga

アンチ・エイジングシリーズ1「白髪・脱毛・育毛の実際」メラニン色素輸送メカニズムの解明

抗衰老系列1《白发、脱发、生发的真相》阐明黑色素输送机制

• 发表时间: 2005
• 作者: 福田光則;黒田垂歩
• 通讯作者: 黒田垂歩

Assay of Rab binding specificity of rabphilin and Noc2 : Target molecules for Rab27.

rabphilin 和 Noc2 的 Rab 结合特异性测定：Rab27 的靶分子。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Methods Enzymol. 403
• 作者: Fukuda;M.;Yamamoto;A.
• 通讯作者: A.