膜輸送を司る低分子量G蛋白質Rabのエフェクタードメインの統合的解析

Rab（一种控制膜转运的低分子量 G 蛋白）效应结构域的综合分析

• 批准号: 20054001
• 负责人: 福田 光則
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20054001/
• 关键词: 低分子量G蛋白質; 網羅的解析; 酵母two-hybrid; Rab; Rabエフェクター; コイルドコイル; Rabパネル; 膜輸送

膜輸送を司る低分子量G蛋白質Rabは、Rasスーパーファミリーの中で最大のサブファミリーを形成し、哺乳動物においては60種類以上の異なるアイソフォームが存在する。RabはGTPを結合した活性化型とGDPを結合した不活性化型の二つの状態をとり、活性化型のGTP-Rabがエフェクター(effector)と呼ばれるパートナー分子と特異的に結合することにより膜輸送を促進する。哺乳動物に存在する60種類のRabはそれぞれ特異的なエフェクター分子と結合することにより、それぞれ特異的な膜輸送を促進し、様々な生命現象に関与するものと推察されている。Rabを介する生命現象の分子基盤を解明する第一のステップとしては、特異的なエフェクター分子の同定が最も重要と考えられる。そこで本研究では、当研究室で独自に開発した「Rabの網羅的解析ツール(Rab panel)」を用い、マウスに存在する全てのRabアイソフォームを対象にエフェクター分子の網羅的スクリーニングを行うとともに、同定された分子のRabエフェクタードメインの決定に着手した。具体的には、Rab1〜30の活性化型固定化変異体をbaitに酵母two-hybrid法により、20種類以上の新規Rabエフェクター候補分子の同定に成功した(Mol. Cell. Proteomics(2008)7 : 1031-1042)。得られた候補分子のRab結合ドメインの解析から、多くのものではcoiled-coil領域がRab結合ドメインとして機能するという新たな知見を得ることができた。また、得られた候補分子のRab結合特異性の解析から、RabとRabエフェクターの結合関係は必ずしも1:1ではなく、同定された候補分子の半数以上のものは複数のRabアイソフォームと結合するという意外な事実が明らかになってきた。

Rab 是一种负责膜运输的小 G 蛋白，是 Ras 超家族中最大的亚家族，在哺乳动物中存在 60 多种不同的亚型。 Rab 有两种状态：结合 GTP 的激活型和结合 GDP 的失活型。激活的 GTP-Rab 特异性结合称为效应子的伙伴分子，从而促进膜打开。据推测，哺乳动物中存在的 60 种 Rab 中的每一种都通过与特定效应分子结合来促进特定膜转运，并参与各种生物现象。特定效应分子的鉴定被认为是阐明 Rab 介导的生物现象的分子基础的最重要的第一步。因此，在本研究中，我们使用我们实验室最初开发的“Rab综合分析工具（Rab panel）”来全面筛选小鼠中存在的所有Rab亚型的效应分子，并着手确定已识别分子的Rab效应结构域。 。具体地，我们使用Rab1-30的活化固定化突变体作为诱饵，使用酵母二杂交方法成功地鉴定了20多个新的Rab效应候选分子（Mol.Cell.Proteomics（2008）7：1031-1042）。对获得的候选分子的 Rab 结合域的分析得出了新的发现，即卷曲螺旋区域在许多分子中充当 Rab 结合域。此外，对获得的候选分子的Rab结合特异性的分析表明，Rab和Rab效应子之间的结合关系不一定是1:1，并且超过一半的鉴定的候选分子与多个Rab亚型结合，这是一个令人惊讶的事实。到光。

项目成果

Rab10 in insulin-stimulated GLUT4 translocation

• DOI: 10.1042/bj20071318
• 发表时间: 2008-04-01
• 期刊: BIOCHEMICAL JOURNAL
• 影响因子: 4.1
• 作者: Sano, Hiroyuki;Roach, William G.;Lienhard, Gustav E.
• 通讯作者: Lienhard, Gustav E.

Functional significance of repressor element 1 silencing transcription factor (REST) target genes in pancreatic βcells

阻遏元件1沉默转录因子（REST）靶基因在胰腺β细胞中的功能意义

• 发表时间: 2008
• 期刊: Diabetologin 51
• 作者: Navin. D.;Allagnak F.;Chaliard;G.;CaUle;D.;Fukuda;hi;Regazei R.;Ahderrahmani A.;Waeber;G.. Meda. R;Maechler;P. & Haefliger;J.A.
• 通讯作者: J.A.

Human RME-8 Is Involved in Membrane Trafficking through Early Endosomes

• DOI: 10.1247/csf.07045
• 发表时间: 2008-01-01
• 期刊: CELL STRUCTURE AND FUNCTION
• 影响因子: 1.5
• 作者: Fujibayashi, Akemi;Taguchi, Tomohiko;Sekiguchi, Kiyotoshi
• 通讯作者: Sekiguchi, Kiyotoshi

Expression of Rab27B-binding protein Slpl in pancreatic acinar cells and its involvement in amylase secretion

Rab27B结合蛋白Splp在胰腺腺泡细胞中的表达及其与淀粉酶分泌的关系

• 发表时间: 2008
• 期刊: Arch. Biochem. Biophys. 475
• 作者: Saegusa;C.;Kanno;E.;Itohara;S. & Fukuda;M.
• 通讯作者: M.

Identification and characterization of a novel Tre-2/Bub2/Cdc16 (TBC) protein that possesses Rab3A-GAP activity

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2008.01251.x
• 发表时间: 2009-01-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Ishibashi, Koutaro;Kanno, Eiko;Fukuda, Mitsunori
• 通讯作者: Fukuda, Mitsunori