多彩なRabエフェクター分子群によるポストゴルジ輸送経路制御機構の包括的解析

多种 Rab 效应分子对高尔基体后转运通路控制机制的综合分析

• 批准号: 19H03181
• 负责人: 吉村 信一郎
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19H03181/
• 关键词: Rab; エンドソーム; リソソーム; 一次繊毛; ゴルジ体; 細胞膜; エンドサイトーシス; エクソサイトーシス; 繊毛

前年度からの継続で、我々が新たに同定したRab結合タンパク質の機能解析を行った。今年度は特にRab8ファミリータンパク質とそれらの結合タンパク質と一次繊毛との関係に関して進展が見られた。Rab8ファミリーに結合することが知られていたEHBP1L1タンパク質は、その特異的抗体の染色により一次繊毛周辺に局在することを発見した。超解像度顕微鏡による詳細な解析により、EHBP1L1は一次繊毛形成初期段階に出現するpreciliary vesicle (PV)に一時的に局在することを明らかにした。さらにEHBP1L1の結合タンパク質として新たにCD2APタンパク質とそのファミリー分子であるCIN85を同定し、CD2AP/CIN85がEHBP1L1依存的にPVに局在することを明らかにした。またEHBP1L1とCD2AP/CIN85の発現量をそれぞれの特異的なsiRNAの導入により抑制すると、繊毛長が伸展することを我々は確認した。CD2AP/CIN85はアクチンネットワークを制御するアダプタータンパク質として知られている。そこで一次繊毛形成初期段階においてPVや基底小体周辺におけるアクチンネットワークを調べたところ、基底小体周辺でのArp2の存在量がEHBP1L1やCD2AP/CIN85のsiRNAにより低下していた。これらのことよりEHBP1L1とCD2APは一次繊毛形成を負に調節する因子であることが示唆された。

从上一年开始，我们对新鉴定的兔结合蛋白进行了功能分析。今年，在Rab8家族蛋白及其结合蛋白和原发性纤毛之间的关系方面取得了尤其取得的进展。发现EHBP1L1蛋白（已知与Rab8家族结合）通过染色其特异性抗体在原代纤毛周围定位。超分辨率显微镜的详细分析表明，EHBP1L1暂时定位于精确的囊泡（PV），该囊泡出现在原发性纤毛形成的早期阶段。此外，我们确定了一种新的CD2AP蛋白及其家族分子CIN85是EHBP1L1的结合蛋白，揭示了CD2AP/CIN85以EHBP1L1依赖性方式定位于PV。我们还证实，通过引入特定的siRNA来抑制EHBP1L1和CD2AP/CIN85的表达水平，从而增强了纤毛长度。 CD2AP/CIN85被称为调节肌动蛋白网络的衔接蛋白。因此，当我们在原发性纤毛形成的早期阶段调查了PV和基底体周围的肌动蛋白网络时，EHBP1L1和CD2AP/CIN85的siRNA降低了基底体周围的ARP2的丰度。这些表明EHBP1L1和CD2AP是对原发性纤毛形成负调节的因素。

项目成果

Loss of Rab6a in the small intestine causes lipid accumulation and epithelial cell death from lactation

小肠中 Rab6a 的缺失会导致脂质积累和哺乳期上皮细胞死亡

• DOI: 10.1096/fj.202000028r
• 发表时间: 2020
• 期刊: The FASEB Journal
• 作者: Iwaki Ayano;Moriwaki Kenta;Sobajima Tomoaki;Taniguchi Manabu;Yoshimura Shin‐ichiro;Kunii Masataka;Kanda Satoshi;Kamada Yoshihiro;Miyoshi Eiji;Harada Akihiro
• 通讯作者: Harada Akihiro

Rab11新規結合分子RELCHによるエンドソーム-TGN間コレステロール輸送の制御

RELCH（一种新型 Rab11 结合分子）控制内体-TGN 胆固醇转运

• 发表时间: 2019
• 作者: Iwaki Ayano;Moriwaki Kenta;Sobajima Tomoaki;Taniguchi Manabu;Yoshimura Shin‐ichiro;Kunii Masataka;Kanda Satoshi;Kamada Yoshihiro;Miyoshi Eiji;Harada Akihiro;吉村信一郎 岩野智彦;吉村信一郎
• 通讯作者: 吉村信一郎

EHBP1L1が一次繊毛形成に果たす役割

EHBP1L1 在初级纤毛发生中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Iwaki Ayano;Moriwaki Kenta;Sobajima Tomoaki;Taniguchi Manabu;Yoshimura Shin‐ichiro;Kunii Masataka;Kanda Satoshi;Kamada Yoshihiro;Miyoshi Eiji;Harada Akihiro;吉村信一郎 岩野智彦
• 通讯作者: 吉村信一郎 岩野智彦