転写障害による神経細胞死の分子的定義の研究

转录障碍引起的神经细胞死亡的分子定义研究

• 批准号: 16650076
• 负责人: 岡澤 均
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16650076/
• 关键词: 転写; ポリグルタミン; 細胞死; 神経; YAP; p73; 神経変性; 神経細胞死; 変性; アポトーシス

ポリグルタミン病においては転写障害が重要なpathomechanismであることが知られている。本研究課題では、この事実を背景に転写障害が生じた場合に、どのような変化が神経細胞において生じるかを、形態学、生化学、分子生物学的な手法を用いて、総合的に解析した。先ず、RNAポリメラーゼIIの特異的な阻害剤として知られるアルファアマニチンを初代培養神経細胞の培地に加え生存曲線を検討した。結果としてアルファアマニチンによる転写抑制が神経細胞に極めて緩慢な細胞死を生じさせることが明らかになった。形態学的には、アポトーシス、ネクローシス、あるいはオートファジーの特徴は見られなかった。すなわち、核クロマチンの濃縮、断片化はなくDNA fragmentationもなかった。カスパーゼ阻害薬もこの細胞死には効果がなかった。ネクローシスのようなミトコンドリア膨張や細胞膜の破たんなどの形態変化もなく、変わりに核周囲の細胞質に空胞の形成が認められた。この空胞はマーカー蛋白の検索から小胞体であると推定された。次に、分子生物学的検索としてジーンチップを用いて、この細胞死に特異的な発現変化を示す分子をさがした。結果としてYAPがその候補として見い出された。驚いたことに、YAPには神経細胞に特異的に発現するアイソフォームがあり、これは細胞死を促進するp73の機能を阻害することがわかった。アポトーシスでは一般型のYAPがp73と協調して細胞死を促進するのに対して、本研究で発見した転写抑制性細胞死ではYAPアイソフォームが発現して細胞死を遅らせていることが想像された。以上の解析から、この細胞死を新しい典型と考えTRIAD(TRANSCRIPTIONAL REPRESSION-INDUCED DEATH OF NEURONS)と命名し、JCBに報告した。

众所周知，病理学是一种重要的聚谷氨酰胺疾病。在这项研究中，这一事实全面分析了在背景中发生转录失败时神经细胞中发生的变化。首先，检查了幸存者的α曼尼丁蛋白，该α马尼辛蛋白被称为RNA聚合酶II的特异性抑制剂，以对第一培养神经细胞培养基。结果，已经揭示了α马尼丁蛋白的转移抑制会导致神经细胞中的细胞死亡极为缓慢。以这种形式，未看到凋亡，坏死或自噬的特征。也就是说，没有核染色质的浓度或碎片化，也没有DNA碎裂。 Casperase抑制剂也对这种细胞死亡没有影响。形态学没有变化，例如线粒体扩张，例如坏死或细胞膜破裂，并且在细胞核周围的细胞中发现了空细胞。从寻找标记蛋白为内极的估计，该空细胞是估计的。接下来，作为分子生物搜索，分子使用基因芯片显示了细胞死亡的独特表达变化。结果，YAP被发现为候选人。令人惊讶的是，YAP在神经细胞中具有同工型特异性同工型，这表明它阻碍了促进细胞死亡的p73功能。在凋亡中，可以想象YAP在本研究中发现的转录抑制细胞死亡中表达，而在这项研究中延迟了细胞死亡，而一般YAP与P73合作。从上面的分析中，该细胞死亡称为三合会（转录抑制引起的神经元死亡），并将其报告给JCB。

项目成果

Cystathionine b-synthetase, a key enzyme for homocysteine metabolism, is preferentially expressed in the radial glia/astrocyte lineage of developing mouse CNS.

胱硫醚 b-合成酶是同型半胱氨酸代谢的关键酶，优先在发育中的小鼠中枢神经系统的放射状胶质细胞/星形胶质细胞谱系中表达。

• 发表时间: 2005
• 期刊: FASEB Journal 19
• 作者: Kuwahata M;Kuramoto Y;Tomoe Y;Sugata E;Segawa H;Ito M;Oka T;Miyamoto K.;Ito M;Miyamoto K;Sagawa H;Takeda E;Segawa H;Kuwahara M;Saito H;宮本賢一;宮本賢一;Hoshino M. et al.;Enokido Y. et al.;Qi Y.et al.;Marubuchi S. et al.;Enokido Y. et al.
• 通讯作者: Enokido Y. et al.

Preventive or therapeutic agent for neurological disorder.

神经障碍的预防剂或治疗剂。

• 发表时间: 2006

Distinct aggregation and cell death patterns among different types of primary neurons induced by mutant huntingtin protein

• DOI: 10.1111/j.1471-4159.2004.02372.x
• 发表时间: 2004-05
• 期刊: Journal of Neurochemistry
• 影响因子: 4.7
• 作者: K. Tagawa;M. Hoshino;T. Okuda;H. Ueda;H. Hayashi;S. Engemann;H. Okado;M. Ichikawa;E. Wanker;H. Okazawa

Distinct aggregation and cell death patterns among different types of primary neurons induced by mutant huntingtin.

突变亨廷顿蛋白诱导的不同类型原代神经元之间的独特聚集和细胞死亡模式。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Neurochemstry 89
• 作者: Kuwahata M;Kuramoto Y;Tomoe Y;Sugata E;Segawa H;Ito M;Oka T;Miyamoto K.;Ito M;Miyamoto K;Sagawa H;Takeda E;Segawa H;Kuwahara M;Saito H;宮本賢一;宮本賢一;Hoshino M. et al.;Enokido Y. et al.;Qi Y.et al.;Marubuchi S. et al.;Enokido Y. et al.;Okuda T. et al.;Tagawa K. et al.;OKUDA et al.;TAGAWA et al.
• 通讯作者: TAGAWA et al.

Transcriptional repression induces a slowly progressive atypical neuronal death associated with changes of YAP isoforms and p73.

• DOI: 10.1083/jcb.200509132
• 发表时间: 2006-02-13
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Hoshino M;Qi ML;Yoshimura N;Miyashita T;Tagawa K;Wada Y;Enokido Y;Marubuchi S;Harjes P;Arai N;Oyanagi K;Blandino G;Sudol M;Rich T;Kanazawa I;Wanker EE;Saitoe M;Okazawa H
• 通讯作者: Okazawa H