アミノ酸ホモポリマー沈着による病態の階層モデル

氨基酸均聚物沉积引起的病理分层模型

基本信息

批准号：
17657043
负责人：
石浦章一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

ハンチントン病や脊髄小脳失調症に代表されるトリプレットリピート病では、3塩基繰り返し配列が遺伝子の翻訳領域内に存在するため、連続したアミノ酸(ホモポリアミノ酸)をタンパク質内に保持することになり、それが細胞死の原因になっていることが明らかになってきた。この原因を特定するため、伸長ポリアミノ酸を人工的に黄色蛍光タンパク質のC末端につけて細胞に発現させる系を20種類構築し、サル腎臓細胞COSやモデル動物である線虫のtouch neuronに発現させた。その結果、疎水性アミノ酸に強い細胞毒性を認めた。平成18年度、コンディショナルにポリアミノ酸を発現させることのできるYFP-ポリアミノ酸融合コンストラクトを作成した。これにはTet-offシステムを採用した。その結果、疎水性ポリアミノ酸を発現させたものでの、ミトコンドリアからのシトクロムCの遊離が顕著であった。この結果、ミトコンドリアを介したアポトーシス経路の活性化が確認された。次に、ポリアミノ酸を発現する線虫を作成した。特に線虫のtouch neuron特異的にポリアミノ酸(特に、ポリアラニン)を発現させ、細胞死を起こすと接触刺激に無反応になるという行動実験から、生体内での細胞死を直接行動に反映させてアッセイした。本研究では、細胞と個体レベルでのポリアミノ酸の効果を判定できる系を確立することができた。

在三重重复疾病（例如Handington疾病和脊柱小脑）中，在基因的翻译区域中存在三个基础的阵列，因此我们将在蛋白质中持续持续氨基酸。细胞死亡。为了识别这一原因，在细胞中构建了20种系统，并在细胞中表达，触摸神经元通过人为地将延伸性聚氨基酸连接到黄色荧光蛋白的C端来在细胞中人为地表达。结果，人们认识到疏水性氨基酸对细胞具有抗性。在2006年，我们创建了一个YFP-聚氨基酸融合竞赛，可以在条件下表达聚氨基酸。这有一个tet-off系统。结果，线粒体中柠檬瘤C的释放在水文聚氨基酸的表达中是显着的。结果，证实了通过线粒体的凋亡途径的激活。接下来，产生了一系列表达聚氨基酸的昆虫。特别是，该线的触摸神经元的毛氨基酸（尤其是多氨基酸）反映在行为实验中，而在细胞死亡发生时对接触刺激没有反应。在这项研究中，可以建立一个可以确定细胞和个体水平上聚氨基酸的影响的系统。

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A novel β-secretase inhibitor KMI-429 reduces amyloid β peptide (Aβ) production in amyloid precursor protein (APP) transgenic and wild-type mice.

一种新型 β-分泌酶抑制剂 KMI-429 可减少淀粉样蛋白前体蛋白 (APP) 转基因和野生型小鼠中淀粉样蛋白 β 肽 (Aβ) 的产生。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J.Neurochem. 96
影响因子：
0
作者：
Asai;M.;Hattori;C.;Iwata;N.;Saido;S.C.;Sasagawa;N.;Szabo;B.;Hashimoto;Y.;Maruyama;K.;Tanuma;S.;Kiso;Y.;Ishiura;S.
通讯作者：
S.

DAPT-induced intracellularaccumulations of longer amyloid □-protein : Further implications for the mechanism of intramembrane cleavage by □-secretase.

DAPT 诱导的较长淀粉样 □-蛋白的细胞内积累：对 □-分泌酶膜内裂解机制的进一步影响。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Biochemistry 45
影响因子：
0
作者：
Yagishita;S.;Kawashima-Morishima;M.;Tanimura;Y.;Ishiura;S.;Ihara;Y.
通讯作者：
Y.

A simple, one step cloning method to obtain long artificial triplet repeats.

一种获得长人工三联体重复序列的简单一步克隆方法。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Anal.Biochem. 357
影响因子：
0
作者：
Sasagawa;N.;Ishiura;S.
通讯作者：
S.

The Hesr1 knockout mice exhibit behavioral alterations through the dopaminergic nervous system.

Hesr1 基因敲除小鼠通过多巴胺能神经系统表现出行为改变。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J.Neurosci.Res. 84
影响因子：
0
作者：
Fuke;S.;Minami;N.;Kokubo;H.;Yoshikawa;A.;Yasumatsu;H.;Sasagawa;N.;Saga;Y.;Tsukahara;T.;Ishiura;S.
通讯作者：
S.

Comparative analysis of the cytotoxicity of homopolymeric amino acid

均聚氨基酸的细胞毒性比较分析