アルツハイマー病発症に関わる新規プロテアーゼの検索

寻找与阿尔茨海默病发病有关的新蛋白酶

基本信息

批准号：
10163211
负责人：
石浦章一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度、APPのC末端10アミノ酸欠失変異体Iと小胞体ソーティング付加変異体IIを用いて、APPの細胞内代謝を検討し、これに関与するタンパク質分解系を検討した。まずCOS細胞に発現させたIでは、細胞外への分泌が促進しており、C末端のアミノ酸の中に細胞内移行を決定させる因子が存在することを示唆するデータを得た。一方、アデノウイルスE19タンパク質の持つ小胞体取り込みシグナルを人工的に付加した変異体では、APPはいったん膜上にソーティングされた後再び細胞内に取り込まれ、分泌量が減ることが明らかになった。同時に、正常なAPP代謝過程と考えられるα型切断は、分泌過程の後期に行われることもわかった。次に、APPのプロセシングに関わるプロテアーゼを明らかにするため、cDNAの導入をアッセイ法としてセクレターゼを探索した。その結果、α型切断はADAMファミリー型メタロプロテアーゼ、β型切断はThimet oligopeptidaseによって行われることが判明した。特に前者はMDC9と考えられており、ADAMファミリーの酵素が細胞内でのプロセシングに関与しているのは興味ある知見であった。この両方は世界で初めての発見であり、β型切断の阻害はアミロイドβタンパク質の減少を介してアルツハイマー病を治す可能性もあり今後、アルツハイマー病の治療薬開発の方向性を示したという点に関して有望な結果と考えられた。

今年，我们使用应用10氨基酸诱导的App c末端诱导的物体和氨基酸诱导的身体II和带有底物分选的其他变体II检查了应用程序的细胞内代谢。首先，在COS细胞的情况下，促进了细胞外部的分泌，数据表明，在C末端，氨基酸的因素决定了细胞内过渡。另一方面，在人为地添加腺病毒E19蛋白质构成信号的突变体中，据揭示了该应用程序曾经在膜上进行分类，并再次被掺入细胞中，从而减少了分泌量。同时，发现在分泌过程的后半段进行了α型切割，被认为是正常的应用代谢过程。接下来，我们探讨了cDNA的介绍作为分析法，以阐明与应用程序处理相关的过程。结果，发现α型切割是由亚当家族型金属蛋白酶进行的，β型切割是由寡肽酶进行的。特别是，前者被认为是MDC9，这是一个有趣的知识，即亚当家族酶参与细胞中的细胞。两者都是世界上最初的发现，抑制β型切割可以通过淀粉样蛋白β蛋白的降低来治愈阿尔茨海默氏病，将来它显示了为阿尔茨海默氏病的治疗药物发展的方向。有希望的结果。