ネオスポラ症に対する次世代ワクチン株の開発と原虫ベクター化への応用展開

下一代新孢子虫病疫苗株的研制及其在原生动物矢量化中的应用

基本信息

批准号：
20K21359
负责人：
西川義文
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-07-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K21359/
关键词：
原虫ネオスポラワクチンベクターガン遺伝子編集

项目摘要

免疫学の発展によりウイルスや細菌に対する各種ワクチンが開発されているが、原虫病に対するワクチン開発は困難を極めている。近年の遺伝子編集技術の開発・進歩により様々な生物種への遺伝子導入や遺伝子破壊が容易となり、原虫の研究分野においても遺伝子を欠損させることでその病原性を弱めることが可能となってきた。そこで本研究では我々が確立した遺伝子編集技術を基盤として、原虫独自の代謝経路と感染伝搬能力を欠損させた次世代のワクチン株を作出し、さらにそのワクチン株に異種抗原遺伝子を組み込んだ原虫ベクターワクチン株を開発することにより様々な難治性原虫病の制圧及び癌ワクチン開発を目指している。2022年度は以下の項目を明らかにした。ベクターワクチン株の作製：感染伝搬能力が欠損し潜伏感染できない原虫株 (NeoMD株)について、前年度に検証した株とは別の原虫株を作製し感染伝搬能力を解析した（NeoMD-2株）。NeoMD-2株は、親株原虫と比較してマウスに対する病原性が低下し（マウス生存率の上昇、臨床症状の低下）、マウス妊娠期感染による垂直感染率の低下も確認された。今後は、NeoMD株とNeoMD-2株を基盤としたベクター開発に展開していく。ネオスポラの親株原虫に異種原虫のタンパク質であるトキソプラズマ抗原遺伝子を導入し、一過性の発現を確認した。今後はクローニングを完了させ、本組換えネオスポラを免疫したマウスがトキソプラズマの感染に対し感染防御効果を有するか検証する。次にネオスポラ接種による抗腫瘍効果の誘導を確認するために、マウスを用いた癌細胞移植モデルを構築した。興味深いことに、ネオスポラ接種による腫瘍退縮効果を確認した。

随着免疫学的发展，已经针对病毒和细菌开发了各种疫苗，但是针对原生动物疾病的疫苗开发非常困难。基因编辑技术的最新发展和进步使将基因引入各种物种并破坏基因变得更加容易，在原生动物的研究领域，通过删除基因来削弱致病性。因此，在这项研究中，我们旨在克服各种可治性的原生动物疾病，并通过创建下一代疫苗疫苗菌株，这些疫苗菌株缺乏缺乏原生动物的独特代谢途径和感染传播能力，并通过将原生动物媒介物抑制各种疫苗，并在其中抑制各种疾病，并在此发展，并抑制各种疫苗，并抑制各种疾病，并抑制各种疾病，并在其中抑制了疾病，并抑制了各种各样的抗癌性抗药性抗药性抗药性抗药性抗药性抗药性抗体，并将疫苗。在2022财政年度揭示了以下项目。载体疫苗菌株的制备：原生动物菌株（NEOMD菌株）缺乏感染传播能力并且无法在潜在地进行感染，并产生感染传播能力（NEOMD-2菌株）。与原生动物的父母菌株（生存率和临床症状的增加）相比，NEOMD-2菌株的致病性降低，并且还证实了小鼠怀孕期间感染引起的垂直感染率降低。将来，我们将根据NEOMD和NEOMD-2菌株开发向量。将弓形虫抗原基因（一种异源原生动物的蛋白质）引入到新孢子的原生动物中，并证实了瞬时表达。将来，克隆将完成，并用这种重组新孢子免疫的小鼠是否具有针对弓形虫感染的感染保护作用。接下来，构建了使用小鼠的癌细胞移植模型，以确认新孢子接种诱导抗肿瘤作用。有趣的是，新孢子接种的肿瘤回归作用已得到证实。