トキソプラズマ原虫の発育ステージ変換機構の解明と新規ワクチンの開発

弓形虫发育阶段转换机制的阐明及新疫苗的研制

基本信息

批准号：
10F00110
负责人：
西川義文
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、人獣共通感染症の原因原虫でもあるトキソプラズマ原虫の宿主体内における発育ステージ(急性感染期のタキゾイト→慢性感染期のブラディゾイト)変換機構の解明と新規弱毒ワクチン開発を目指して企画した。本年度に実施した研究内容と得られた研究成果は以下の通りである。タキゾイトとブラディゾイト虫体ESTデータベースによる各遺伝子の転写レベルの比較を行ったところ、多くのステージ特異的転写遺伝子の存在が確認された。その中で、虫体のレドクスシステム(酸化還元系)の関連酵素-グリオキサラーゼI(メチルグリオキサール(MG)とグルタチオン(GSH)からS-D-ラクトイルグルタチオンを生成させる酵素)遺伝子のクローニングと解析を行った。グリオキサラーゼI(TgGlo1)遺伝子は、1,008-bpのORFよりなり、推定タンパク質の分子量は38.5-kDaであった。TgGlo1の機能ドメインフラグメントを大腸菌にて発現し、組換えタンパク質に対する免疫血清を作製した。この抗血清を用いたイムノブロット法により、38.5-kDaの虫体由来TgGlo1タンパク質が同定できた。また、組換えTgGlo1の酵素活性も確認された。TgGlo1の機能ドメインの二つのアミノ酸残基(E166、R188)が酵素活性に必須であることも確認された。この酵素活性はグリオキサラーゼのインヒビターであるcurcuminにより特異的に抑制された。また、curcuminは試験管培養においてトキソプラズマ原虫の増殖を顕著に抑制した。さらに、マウスモデルにおける治療試験においても一部治療効果が認められた。今後、TgGlo1の虫体発育ステージへの関与の解明が待たれる。

这项研究计划阐明发育阶段转化的机理（急性感染中的tachyzoites在慢性感染中的牛皮二氮族）内，在弓形虫原生动物的宿主中，这也是生物性疾病的原因，这也是引起人畜共患疾病的原因，并开发了一种新的衰减疫苗。今年进行的研究内容和获得的研究结果如下。使用Tachyzoite和Bradyzoite蠕虫EST数据库比较每个基因的转录水平证实存在许多阶段特异性的转录基因。其中，对昆虫氧化还原系统（氧化还原系统）-Glyoxalase I（一种酶（一种酶）（一种从甲基甘氨酸（MG）和谷胱甘肽（GSH）中产生S-D-乳糖lutathione（GSH）（GSH）的基因，并分析并分析。糖氧化氢酶I（TGGLO1）的基因（tgglo1）基因（TGGLO1）的估计量和1,008-bp，以及1,008-BP 38.5 kda。（E166，R188）在TGGLO1的功能结构域中，该酶活性是由姜黄素的抑制剂特别抑制的。我们期待阐明TGGLO1参与昆虫生长阶段。