トキソプラズマ原虫の発育ステージ変換機構の解明と新規次世代型ワクチンの開発

弓形虫发育阶段转换机制的阐明及新一代疫苗的开发

• 批准号: 22248034
• 负责人: 玄 学南
• 金额: $ 7.07万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22248034/
• 关键词: Toxoplasma; 生活環; ステージ変換; 病原性; 弱毒化; トランスクリプトーム; タキゾイト; ブラディゾイト

本研究は、トキソプラズマ原虫の発育ステージ(急性感染期のタキゾイト→慢性感染期のブラディゾイト)変換の分子機構の解明と新規次世代型ワクチン開発を目指して実施する。本年度に実施した研究内容と得られた研究成果は以下の通りである。1. 試験管内ステージ変換系を確立した。試験管内で人為的にタキゾイトからブラディゾイトへのステージ変換を促し、大量のブラディゾイト虫体を得ることができた。2. ブラディゾイト虫体の完全長cDNAラブラリーとESTデータベースを作成した。ブラディゾイト虫体のRNAを抽出し、オリゴキャッピング法にて完全長cDNAライブラリーを構築した後、約10,000クローンの全塩基配列を解読し、ESTデータベースを作成した。3. トランスクリプトーム解析を行った。以前当研究グループで構築したタキゾイトESTデータベースと2)で作成したブラディゾイトESTデータベースの比較により、タキゾイト或いはブラディゾイト単一ステージのみに特異的に発現する遺伝子を網羅的に探索した。その結果、タキゾイトとブラディゾイト特異遺伝子がそれぞれ424個と759個が同定された。そのうち転写制御因子と推定されるAP2遺伝子がそれぞれ4個と6個が含まれていた。また.ブラディゾイト特異的に発現するAP2はCCAGTGモチーフに結合することで、ステージ特異的な転写制御が行われている可能性が示唆された。

进行这项研究的目的是阐明弓形虫原生动物转化的分子机制（急性感染中的tachyzoites在慢性感染中向铁二核）并发展了新的下一代疫苗。今年进行的研究内容和获得的研究结果如下。 1。已经建立了体外阶段转换系统。在试管中，人为地促进了速氮族对bradyzoites的阶段转化，从而产生了大量的牛龙蠕虫体。 2。创建了Bradyzoite蠕虫体的全长cDNA和EST数据库。从Bradyzoite蠕虫物体中提取RNA后，使用寡量化方法构建了全长cDNA库，将大约10,000个克隆的整个基本序列解码以创建一个EST数据库。 3。进行转录组分析。通过比较先前由我们的研究小组构建的tachyzoite EST数据库以及在2）中创建的Bradyzoite EST数据库，我们全面搜索了仅在tachyzoite或bradyzoite的单个阶段中专门表达的基因。结果，分别鉴定了424和759次二核和铁二核特异性基因。其中，分别包括了四个和六个AP2基因，分别包括推定的转录调节剂。此外，有人提出，在Bradyzoite中专门表达的AP2与CCAGTG基序结合，这可能导致特定于阶段的转录调控。

项目成果

比較トランスクリプトームによるトキソプラズマステージ変換機構の解析

使用比较转录组分析弓形虫阶段转换机制

• 发表时间: 2010
• 作者: 加藤善隆;川鍋陽;神取秀樹;Imai Saki;山岸潤也
• 通讯作者: 山岸潤也

Full-parasites : Databases of full-length cDNAs of apicomplexa parasites, 2010 update.

全寄生虫：apicomplexa 寄生虫全长 cDNA 数据库，2010 年更新。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Nucleic Acids Res.
• 作者: Tuda;et al.
• 通讯作者: et al.