新規ストレス応答メカニズムに基づく炎症性腸疾患分子標的薬の探索

基于新型应激反应机制寻找炎症性肠病分子靶点药物

基本信息

批准号：
21K19523
负责人：
中津史
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19523/
关键词：
炎症性腸疾患

项目摘要

炎症性腸疾患(Inflammatory bowel disease: IBD)は、腸管組織に炎症や潰瘍を引き起こす疾患の総称で、その原因は不明な点が多い。患者数は年々増加しており、病態機序の解明、および治療薬開発は急務である。本研究では、我々が最近同定した新規ストレス応答メカニズムに着目し、炎症性腸疾患の分子標的薬を探索することを目指している。今年度は、引き続きスクリーニング評価系の構築を行った。本評価系は、我々が新たに見出したストレス応答経路に着目し、その活性化をルシフェラーゼの酵素活性の上昇によって検出するという戦略である。そのため、ルシフェラーゼ活性をノイズを抑えつつ高感度に検出する必要があることから、指標となるルシフェラーゼ活性の検出感度の改善に取り組んできた。ルシフェラーゼフラグメントをN末端に配置する場合とC末端側に配置する場合、そしてそれらをつなぐリンカー配列を様々な組み合わせで評価を行った。リンカーについては長さの異なるフレキシブルリンカーを用いた。また、発光検出に用いる機器に適した培養条件および細胞数の再検討を行った。発現ベクター系の再構築も並行して検討中であり、さらなる改良が必要であると考えられる。これらに加え、スクリーニング評価に向けた個体レベルでの解析を進めた。イノシトールリン脂質制御遺伝子改変モデル動物を用いたトランスクリプトームデータをもとに解析を行ったところ、特に免疫システムおよび炎症に関わるシグナル伝達経路に関与する遺伝子群に大きな変動が見られた。

炎症性肠病（IBD）是引起肠道组织炎症和溃疡的疾病的总称，其病因很大程度上尚不清楚。患者数量逐年增加，迫切需要阐明其病理机制并开发治疗药物。在这项研究中，我们重点关注我们最近发现的一种新型应激反应机制，旨在寻找治疗炎症性肠病的分子靶点药物。今年，我们继续构建筛选评价体系。该评价体系重点关注我们新发现的应激反应途径，并采用通过增加荧光素酶活性来检测其激活的策略。因此，需要在抑制噪音的同时以高灵敏度检测荧光素酶活性，因此我们一直致力于提高作为指标的荧光素酶活性的检测灵敏度。我们评估了将荧光素酶片段置于N末端的情况、将其置于C末端的情况以及连接它们的接头序列的各种组合。对于连接体，使用不同长度的柔性连接体。我们还重新检查了适合发光检测设备的培养条件和细胞数量。表达载体系统的重建也在考虑中，并且认为有必要进一步改进。除此之外，我们还进行了筛选评估的个体水平分析。使用肌醇磷脂调节的基因修饰模型动物进行的基于转录组数据的分析揭示了巨大的变化，特别是涉及与免疫系统和炎症相关的信号转导途径的基因。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

脂質交換輸送ゾーンの制御と機能

脂质交换运输区的调节和功能

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
中津　史
通讯作者：
中津　史

新規蛍光プローブによる細胞膜ホスファチジルイノシトール 4-リン酸の可視化

使用新型荧光探针观察细胞膜磷脂酰肌醇 4-磷酸

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
阿喰萌香;吉川優;中津史;築地真也
通讯作者：
築地真也

Plasma Membrane Shaping

质膜整形

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Nakatsu F; Kawasaki A
通讯作者：
Kawasaki A

PI4P/PS countertransport by ORP10 at ER-endosome membrane contact sites regulates endosome fission

ORP10 在内质网膜接触位点的 PI4P/PS 反转运调节内体裂变

DOI：
10.1083/jcb.202103141
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
7.8
作者：
Kawasaki A; Sakai A; Nakanishi H; Hasegawa J; Taguchi T; Sasaki J; Arai H; Sasaki T; Igarashi M; Nakatsu F
通讯作者：
Nakatsu F

PI4P-driven lipid countertransport at ER–endosome membrane contact sites

内质网-内体膜接触位点的 PI4P 驱动的脂质反转运