核タンパク質輸送を担う核膜孔ターゲティング複合体構成因子の機能解析

针对负责核蛋白转运的复杂成分的核孔功能分析

• 批准号: 08680764
• 负责人: 今本 尚子
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680764/
• 关键词: 核タンパク質輸送; 核局在化シグナル; 核膜孔; 核膜孔ターゲティング複合体

核蛋白質の核内への移行は、核局在化シグナルに依存した細胞質から核膜孔までの第一のステップと、エネルギーを利用して核膜孔を通過する第二のステップに大きくわけられる。本研究者らは、輸送の第一のステップにおいて、核蛋白質は細胞質で安定な複合体を形成して、はじめて核膜孔にターゲットすることを明らかににし、この複合体のことを「核膜孔ターゲティング複合体(nuclear pore-targeting complex:PTAC)」と名付けた。この複合体を構成する因子のうち、58kDa(PTAC58)と97kDa(PTAC97)の因子が活性に必須であることが明らかとなり、遺伝子クローニングにも成功した。大腸菌で発現させたこれら因子のリコンビナント蛋白質を用いた解析から、PTAC58は、NLSを特異的に認識する受溶体として機能し、PTAC97は)TAC58と核膜孔複合体(NPC)構成因子の両方に結合することによって3者の複合体を核膜孔にまでターゲットする活性を有することがわかった。NLS受容体として機能するPTAC58は大きな分子ファミリーを形成し、同一細胞内にそれぞれが50%程度の相同性をもつホモログが少なくとも3種類あることがわかってきた。また、PTAC97は輸送の第二のステップを担う低分子量G蛋白質の1つであるRanと結合し、Ranの機能とも密接な関連をもつことが明らかになってきた。

核蛋白向核武器的迁移在很大程度上分为从依靠核站到核站到核膜孔的第一步，第二步是使用核膜孔。在运输的第一步中，研究人员阐明了核蛋白在核膜孔中首次与细胞质形成稳定的复合物。在构成复合物的因素中，有58KDA（PTAC58）和97KDA（PTAC97）因素对于活动而言是必不可少的，它在基因克隆方面取得了成功。通过在大肠杆菌中表达的这些因素的重组蛋白的分析，PTAC58起着对NLS的永久性识别，PTAC97）TAC58和核孔隙络合物（NPC）构型。这将三个复合物靶向核膜孔。 PTAC58充当NLS受体，已经形成了一个大分子家族，并且发现至少有三种类型的同源物，约有50％的相同细胞。 PTAC97还揭示了与RAN（低分子量G蛋白之一）结合的，该蛋白是运输的第二步，并且与RAN功能有密切的关系。