表皮細胞内ロジスティクスとしての脂質輸送システムの分子基盤の解明

阐明表皮细胞内脂质运输系统的分子基础

基本信息

批准号：
22659201
负责人：
秋山真志
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22659201/
关键词：
ABCA12 脂質輸送表皮細胞角化脂質バリア

项目摘要

本研究では、表皮細胞の脂質輸送を、脂質輸送蛋白ABCA12を中心とした細胞内ロジスティクスとして捉え、その分子基盤の解明に挑戦した。本研究では、研究代表者の有するABCA12ノックアウト・マウス細胞とsiRNAを用いたノックダウン、3次元培養系を用い、表皮細胞内のABCA12と脂質のダイナミズムの解明を試みた。今回は、ABCA12ノックアウト・マウス、および、ヒトにおけるABCA12ノックアウトである道化師様魚鱗癬患者からの皮膚、ならびに、表皮細胞、ノックアウト・マウス、および、道化師様魚鱗癬患者由来表皮細胞、正常表皮細胞を用いた3次元培養による再構成表皮を対象として、マーカー脂質を用いた脂質輸送のイメージング解析、ならびに、免疫電子顕微鏡によるABCA12と各種脂質についての表皮細胞内超微形態学的局在を検討した。具体的には、(1)ABCA12ノックアウト・マウス、および、ヒトにおけるABCA12ノックアウトである道化師様魚鱗癬患者からの皮膚、ならびに、表皮細胞の準備;(2)マーカー脂質を用いた脂質輸送のイメージング;(3)ノックアウト・マウス、および、道化師様魚鱗癬患者由来表皮細胞を用いた3次元培養による表皮の再構成;(4)培養表皮細胞、ならびに、3次元培養再構成皮膚におけるsiRNAによるABCA12のノックダウンを、当該研究期間に施行した。最終的に、研究結果の総括と疾患治療への応用の可能性の評価を行った。それらの結果から、表皮細胞の分化(角化)の過程における、ABCA12を中心とした細胞内ロジスティクスとしての脂質輸送の概要と脂質バリア形成機序を明らかにした。この成果は皮膚バリア障害を発症機序として共有している多くの皮膚疾患に対する治療法の開発へとつながる。

在这项研究中，我们将表皮细胞中的脂质转运视为细胞内物流，以脂质转运蛋白ABCA12为中心，并挑战了其分子基础。在这项研究中，我们尝试使用ABCA12基因敲除小鼠细胞和siRNA敲低和3D培养系统来阐明表皮细胞中ABCA12和脂质的动力。在本文中，我们研究了使用标记脂质的脂质转运的成像分析，以及来自小丑样虫害患者的ABCA12基因敲除小鼠和人类的皮肤，以及使用表皮细胞，敲除小鼠和正常的体外的患者促进了类似于小丑的异常疾病的甲壳体，并在三维培养物中重新结构的表皮重新结构的表皮。 ABCA12和通过免疫电子显微镜的各种脂质。具体而言，（1）从ABCA12基因敲除小鼠和小丑样的鱼质病患者中制备皮肤和表皮细胞，这些患者在人类中被击倒；（2）使用标记脂质对脂质转运的成像；（3）使用敲除小鼠和表皮细胞从小丑样的鱼质病患者中重建表皮细胞；（4）在研究期间，在培养的表皮细胞和3D培养的重建皮肤中用siRNA敲低ABCA12。最后，研究结果和评估其在疾病治疗中的潜在应用。这些结果揭示了以ABCA12为中心的脂质转运作为细胞内物流的概述，以及在表皮细胞分化过程中脂质屏障形成的机理（角化病）。这一结果导致了许多皮肤疾病的疗法，这些疾病共享皮肤屏障疾病作为一种发育机制。