ヒストンメチル化のダイナミクスと生体機能

组蛋白甲基化的动力学和生物学功能

基本信息

批准号：
21370079
负责人：
立花誠
金额：
$ 12.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21370079/
关键词：
ヒストンエピジェネティクスメチル化 DNAメチル化

项目摘要

1. ヒストン脱メチル化酵素、Jhdm2a、Jhdm2bダブルノックアウトマウスの解析ヒストン脱メチル化酵素、Jhdm2aとJhdm2bは同じ酵素活性を持ち、さらに発現プロファイルも類似している。このことから、機能に重複性が見られることが予想された。まずは遺伝学的に機能の重複性を調べる目的で、Jhdm2aとJhdm2bの双方がヘテロ接合型であるマウスを交配させ、メンデルの法則に従って産仔が生れるのかを調べた。その結果、Jhdm2aとJhdm2bの双方がホモ接合型であるマウスは生まれることが出来なかった。さらに胎児の段階での発生を詳細に解析した結果、受精後7日目よりも早く死亡していることが明らかになった。2. ヒストン脱メチル化酵素、Jhdm2a、Jhdm2bダブルノックアウトES細胞の解析上記に示したように、Jhdm2aとJhdm2bはマウスの発生に極めて重要な機能を有することが分かった。この点をさらに細胞レベルで追及しようと試みた。胚性幹(ES)細胞で条件的にJhdm2aとJhdm2bの双方を欠損できるES細胞を樹立してその表現型を調べた。その結果、Jhdm2abを欠損させると非常に遠やかに(およそ4日)ES細胞が死滅することが明らかとなった。この細胞を用いて遺伝子発現プロファイルを解析した結果、およそ数100の遺伝子がJhdm2ab欠損によって発現の低下を引き起こすことが明らかとなった。これらの遺伝子の発現変化がお細胞の細胞死を引き起こすと考えている。

1。HISTON -REMOLAL酶，JHDM2A，JHDM2B双基因敲除小鼠分析Histon去除酶，JHDM2A和JHDM2B具有相同的酶活性，并且表达谱相似。由此可以预期该功能将是重复的。首先，出于遗传重复，JHDM2A和JHDM2B都跨越了异性恋小鼠，并检查了它们是否可以按照Mendel的定律长大。结果，JHDM2A和JHDM2B都无法诞生的鼠标。此外，详细说明了胎儿阶段的爆发，很明显，它比受精后的第七天死亡。 2。Histon -Removal酶，JHDM2A，JHDM2B双基因敲除ES细胞，如上所示，发现JHDM2A和JHDM2B具有非常重要的功能对于小鼠的产生。我试图在细胞级别进一步追求这一点。检查了胚胎躯干（ES）细胞中JHDM2A和JHDM2B可能会损害的ES细胞以检查表达类型。结果，很明显，当JHDM2AB缺失时，ES细胞被杀死（大约4天）。使用这些细胞对基因表达谱的分析表明，大约100个基因导致JHDM2AB默认值引起的表达降低。我们认为这些基因的表达变化会导致细胞的细胞死亡。