ヒストンH3メチル化酵素Whsc1による転写ネットワーク制御

组蛋白 H3 甲基转移酶 Whsc1 的转录网络调控

• 批准号: 09F09129
• 负责人: 金田 安史
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09F09129/
• 关键词: ヒストン修飾; クロマチン; 転写調節; ES細胞; Whsc1

4p-症候群の原因遺伝子であるヒストンメチル化酵素Whsc1の機能を、心臓形成を支配するホメオドメイン転写因子Nkx2.5とWhsc1の協調した転写制御に焦点を当てて明らかにするために、ES細胞の心筋細胞分化系を試みた。Whsc1を欠損したES細胞はHanging drop法では拍動心筋細胞への分化が抑制されたが、Flk+細胞を抗体を用いてFACSソートし、Op9細胞をフィーダー細胞に用いて、さらにCSAを添加すると、野生型ES細胞と同等に心筋細胞に分化し、単純に心筋細胞への分化が遺伝子欠損により起きる訳でないことが判明した。従って、Whsc1が単純に細胞分化に伴う遺伝子の選別に機能するのではなく、予想したように、何かの調整に機能することが示唆された。また一方で、Whsc1の細胞局在解析では、Whsc1が細胞分裂期に凝集した染色体に局在することを見出した。しかもWhsc1抗体で染色されない染色体が1本存在する。以上の結果は細胞分裂期には転写は一般には不活性化されることから、Whsc1が転写のメモリーに機能することを示唆するとともに、不活性X染色体ではWhsc1が排除されている可能性を示す。今後、細胞周期およびX染色体不活性か、再活性化過程で、Whsc1の細胞局在を追跡する目的で、Whsc1を認識するモノクローナル抗体の作成を試み、細胞染色検定により有効な抗体の絞り込みを行いつつある。

为了阐明组蛋白甲基酶WHSC1的功能，负责4P综合征的基因，重点是控制心脏形成的同源域转录因子NKX2.5和WHSC1的协调转录调控，我们尝试了ES细胞的心肌细胞分化系统。尽管悬挂掉的方法抑制了缺乏WHSC1的ES细胞中击败心肌细胞的分化，但使用抗体使用FACS对FLK+细胞进行排序，使用抗体作为进料细胞，并添加CSA来进一步添加CSA，并且发现在野生型野生型细胞中的分化与野生型细胞相似，因此发现了与野生型和celne的分化相似，而不是将其分化为不同的。因此，有人提出，WHSC1不仅在与细胞分化相关的基因选择中起作用，而在某种程度上如预期的那样起作用。另一方面，WHSC1的细胞定位分析发现，WHSC1定位于在细胞分裂阶段聚集的染色体。此外，还有一种不会用WHSC1抗体染色的染色体。以上结果表明WHSC1在转录记忆中起作用，因为转录通常在细胞分裂阶段失活，并表明WHSC1可能被排除在非活动X染色体中。将来，我们试图创建识别WHSC1的单克隆抗体，目的是跟踪细胞周期中WHSC1的细胞定位和X染色体的无效或重新激活过程，现在通过细胞染色测定法缩小了有效的抗体。

项目成果

The tale of a tail : Histone H2A and the role of its C-terminal tail in chromatin

尾巴的故事：组蛋白 H2A 及其 C 末端尾巴在染色质中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: Ayman Samir Farid;Yoichiro Horii;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;第32回日本分子生物学会
• 通讯作者: 第32回日本分子生物学会