新規イノシトールリン酸結合性蛋白質は癌抑制遺伝子産物か?

新型肌醇磷酸结合蛋白是抑癌基因产物吗？

基本信息

批准号：
13214076
负责人：
平田雅人
金额：
$ 2.62万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214076/
关键词：
イノシトール6リン酸アポトーシス Akt 細胞延命発がん抑制

项目摘要

細胞外から加えたイノシトール6リン酸(InsP_6)のがん細胞(HeLa細胞)に対する影響を検討した。1.細胞外から加えたInsP_6がHeLa細胞の増殖を抑制した。その増殖抑制はソフトアガー中の足場の無い状態でも観察され、がん抑制に有効であることを示す。2.EGFやTNF刺激による細胞延命に関わる機構の素過程、例えばAktのリン酸化と活性化、IκBのリン酸化と分解、NFκBの活性化と細胞内移行、転写の活性化(ルシフェラーゼアッセイ)などがInsP_6によって抑制された。すなわちInsP_6は細胞の延命機構を抑制して、細胞死に至らせる。3.InsP_6をHeLa細胞に加えると単独でアポトーシス(ヘキスト染色、TUNEL染色、cleaved-PARP染色、カスパーゼ3,7,9の分解)を誘発した。4.さらにInsP_6によって誘起されるアポトーシスをミトコンドリアの電位測定、サイトクロームCの遊離などによっても確認した。5.上記のInsP_6の効果は比較的高濃度を必要としたが、InsP_5やInsP_4では10倍程度の低濃度でも同程度の有効性を示した。これらの全ての現象はInsP_6が発がん抑制に有効であることを示している。今後は細胞外から加えたInsP_6が細胞内でどのようなイノシトールリン酸に代謝されるかなども含めて分子メカニズムの解明にむけた研究を進める。次いで、我々が見い出した新規イノシトールリン酸結合性蛋白質を細胞内に導入した際に観察される上記の事象についても検討する。

我们研究了细胞外添加的肌醇六磷酸 (InsP_6) 对癌细胞（HeLa 细胞）的影响。 1.细胞外添加InsP_6抑制HeLa细胞增殖。即使在软琼脂中没有支架的情况下也观察到生长抑制，表明它可以有效抑制癌症。 2. EGF和TNF刺激诱导的细胞存活的基本过程，如Akt磷酸化和激活、IκB磷酸化和降解、NFκB激活和内化、转录激活（荧光素酶测定）等被InsP_6抑制。换句话说，InsP_6 抑制细胞延长寿命的机制，导致细胞死亡。 3.单独向HeLa细胞中添加InsP_6诱导细胞凋亡（Hoechst染色、TUNEL染色、cleaved-PARP染色以及半胱天冬酶3、7和9的降解）。 4.通过线粒体电位测量和细胞色素C释放也证实了InsP_6诱导的细胞凋亡。 5. InsP_6的上述效果需要相对较高的浓度，但InsP_5和InsP_4即使在低约10倍的浓度下也表现出相似的效果。所有这些现象都表明InsP_6具有抑制癌变的作用。未来我们将继续研究阐明其分子机制，包括细胞外添加的InsP_6如何在细胞内代谢为磷酸肌醇。接下来，我们还将讨论当我们发现的新型肌醇磷酸结合蛋白被引入细胞时观察到的上述事件。