人獣共通感染症制御を目指した機能性RNA分子新規デリバリーシステムの開発

开发一种新型功能性RNA分子递送系统，旨在控制人畜共患疾病

基本信息

批准号：
20658071
负责人：
堀本泰介
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20658071/
关键词：
ウイルスベクター感染症獣医学

项目摘要

最近の機能性RNA分子を用いた核酸医療技術の展開は、これまで不可能、不充分であった感染症の制御を可能にする新しい戦略として期待される。従前、アンチセンスRNA、RNAi、RNAアプタマーなどのRNA分子がウイルス増殖を効果的に抑制するという報告が、培養細胞、実験動物レベルで示されている。本研究では、インフルエンザウイルスのRNAゲノムが細胞核内で効率良く転写・複製される性質に着目し、その分子機構を機能性RNA分子の効果的な発現技術(つまり新しい発現デリバリーシステム)に応用したい。特に、インフルエンザをはじめとする人獣共通感染症の防御、治療法の開発を目差す。これまでに、研究代表者らが確立したインフルエンザウイルスベクターにより、RNAランダム配列が発現できることを報告した。また、挿入した配列の発現効率を高めるため、プロモーターの改変を実施したが、期待した通りの成果は得られなかった。そこで、ウイルス遺伝子の非コード領域を組み換えるという方法を考え、9本鎖インフルエンザベクターの構築しその応用を試みたが、やはり発現量に問題がみられ、インフルエンザウイルスをベースとするRNAデリバリーシステムの達成にまでは至らなかった。今後、ベクター構築法についてさらなる検討が必要であると考えられる。特に、増殖型のウイルスを用いるデリバリーシステムの確立には、それ自体の細胞毒性が障害となるという欠点があるため、非増殖型のベクターをデルバリーシステムに応用する必要があると考えられた。

最近开发的使用功能性RNA分子的核酸医疗技术有望成为一种新策略，能够控制以前不可能或不充分的传染病。此前的报道表明，反义RNA、RNAi、RNA适体等RNA分子在培养细胞和实验动物水平上有效抑制病毒增殖。在本研究中，我们将重点关注流感病毒RNA基因组在细胞核内高效转录和复制的特性，并希望将这种分子机制应用于功能性RNA分子的有效表达技术（即一种新的表达方式）。输送系统）。特别是，我们的目标是开发预防和治疗流感等人畜共患疾病的方法。到目前为止，主要研究人员已经报道，可以使用他们建立的流感病毒载体来表达RNA随机序列。此外，为了提高插入序列的表达效率，对启动子进行了修饰，但没有得到预期的结果。因此，我们考虑了重组病毒基因非编码区的方法，构建了9链流感载体，并尝试应用，但还是发现了表达水平的问题，以及流感病毒的使用——基于 RNA 的递送系统尚未实现。未来看来有必要进一步研究载体构建方法。特别地，由于使用增殖病毒建立递送系统具有其自身细胞毒性的缺点，因此认为有必要将非增殖载体应用于递送系统。