HA重複組み換えインフルエンザウイルスの構築と多価(半)生ワクチンへの応用

HA复制重组流感病毒的构建及其在多价（半）活疫苗中的应用

基本信息

批准号：
14021026
负责人：
堀本泰介
金额：
$ 3.84万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、リバース・ジェネティクス法により人為的に多段階の弱毒化を施し、さらに1つの粒子中に現在人で流行中の三種類のHA遺伝子(A/H1,A/H3, B)を同時に組み込んだHA重複組み換えウイルスワクチンの開発を最終目的とする。このワクチンは現在用いられている三種類のウイルスHAを混合した不活化ワクチンに比べ、接種量の制限が排除され、体内の抗原量を増すのみならず、粘膜免疫、細胞性免疫をも誘導できるため優れた免疫効果が期待される。さらに、間違いなく安全性、経済性にも優れる。この組み換えワクチンを作製する前提として、二種類以上のHA遺伝子があるいはキメラHA遺伝子がウイルス中に組み込まれる必要がある。そこでまずA型HIウイルスとB型ウイルスのキメラ遺伝子を構築し、その感染性ウイルス粒子への取込みを検討した。その結果、A型ウイルスHAのN末側シグナル領域より上流(3'非コード領域を含む)とC末側トランスメンブレン領域より下流(5'非コード領域を含む)をB型ウイルスHAに入れ換えたA/BキメラHA遺伝子が効率良く感染性ウイルス粒子中に取り込まれることを発見した。さらに、この組み換えウイルスは、B型野生株の攻撃に対して高い防御効果が認められた。これらの成績から、HA遺伝子のパッケージングおよびHA蛋白質の相互機能性についての情報が獲得でき、今後のHA組み換えウイルスの構築に大きく貢献する。現在、各種HA組み換え体の構築を進めている。

在这项研究中，我们利用反向遗传学方法人为地进行多步衰减，将目前人类普遍存在的三种HA基因（A/H1、A/H3、B）添加到一个粒子中，最终目标是开发出一种HA基因。同时掺入HA复制的重组病毒疫苗。与目前使用的三种病毒混合的灭活疫苗HA相比，该疫苗消除了接种量的限制，不仅可以增加体内抗原量，还可以诱导粘膜免疫和细胞免疫。因此，预期具有良好的免疫效果。此外，它绝对是安全且经济的。作为生产这种重组疫苗的前提，需要将两种或多种HA基因或嵌合HA基因整合到病毒中。因此，我们首先构建了A型HI病毒和B型病毒的嵌合基因，并研究了其掺入感染性病毒颗粒中的情况。结果，A型病毒HA的N端信号区上游（包括3'非编码区）和C端跨膜区下游（包括5'非编码区）被替换我们发现A/B嵌合HA基因被有效地整合到感染性病毒颗粒中。此外，该重组病毒被发现对B型野生株的攻击具有很高的保护作用。这些结果提供了有关HA基因的包装和HA蛋白的相互功能的信息，这将极大地有助于未来HA重组病毒的构建。我们目前正在构建各种 HA 重组体。