リコンビナントGDF-5/ヒアルロン酸を用いた口腔内での移植用自家骨片の作出

使用重组 GDF-5/透明质酸创建用于口内移植的自体骨碎片

基本信息

批准号：
15791245
负责人：
山本松男
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791245/
关键词：
GDF-5 リコンビナント移植自家骨

项目摘要

平成16年度は、移植用の骨組織が、GDF5をアテロコラーゲンを担体に頭蓋皮下近傍に移植した際に誘導形成される過程を免疫組織化学的染色法を用いて詳細に解析した。in vitro系での遺伝子発現の解析を行い、in vivo系解析結果と参照、考察した。・マウスin vivo実験系マウス頭蓋にアテロコラーゲンを担体にリコンビナントGDF5を注入したところ、4週後に安定して骨組織の新生を認めた。免疫組織化学的染色法によりその過程を解析を行ったところ、新生骨はアルシアンブルーに濃染し、軟骨に特異的であるとされるII型コラーゲンに対して陽性であった。骨組織の成熟に従い周囲既存骨と同様の性状を示すようになった。・マウスin vitro実験系マウス頭蓋組織より分離培養した骨芽細胞、骨膜細胞、線維芽細胞における遺伝子発現を検討したところ、軟骨分化に関連する遺伝子の発現が認められた。特に骨膜細胞においてその傾向が顕著であった。移植用骨片の作出のためには、周囲既存骨と連続性のないことが求められる。しかし、本研究で用いた担体では、一部既存骨との連続性が認められ、移植部位や移植した担体の流動性、賦形性に依存する傾向が明らかとなった。新生骨の性状については、骨髄構造も観察され初期の目標の一部を達成したものと判断している。ミニブタを用いた移植用骨片作出の試みでは、作出を試みる骨片の大きさについての条件設定が容易ではない。すなわち、骨組織の新生には周囲から宿主細胞、血管の侵入が欠くことのできない要因だが、この「侵入」という点について担体に大きく依存するものと思われた。この点については検討を継続する予定である。

在2004年，使用免疫组织化学染色详细分析了牙Atelocollagen作为颅骨皮肤附近的载体作为载体作为载体作为载体作为载体时诱导并形成骨骼组织的过程。在体外系统中分析了基因表达，并参考并讨论了体内系统分析的结果。 - 小鼠在体内实验系统将重组GDF5注射到小鼠头骨中，用atelocollagen作为载体，在4周后观察到稳定的再生骨组织。通过免疫组织化学染色对该过程进行了分析，并用Alcian Blue染色，对II型胶原蛋白呈阳性，据说这是针对软骨的。随着骨组织的成熟，它变得与周围现有骨骼的相似。 - 小鼠体外实验系统：当在成骨细胞，骨膜细胞和成纤维细胞中检查基因表达并从小鼠颅骨组织分离并培养时，观察到与软骨分化相关的基因的表达。这种趋势在骨膜细胞中特别明显。为了产生骨骼碎片进行植入，必须与周围现有骨骼具有连续性。但是，这项研究中使用的载体表明现有骨骼有些连续性，表明植入载体的植入，流动性和形态学特性的趋势趋于趋势。关于新骨的性质，还观察到骨髓结构，并确定已经实现了一些初始靶标。当尝试使用迷你猪生产骨骼碎片以植入时，对于尝试生产的骨骼碎片的大小设置条件并不容易。换句话说，宿主细胞和血管从周围区域的侵袭对于新一代的骨组织至关重要，但是人们认为携带者在很大程度上取决于入侵。这一点将继续考虑。