痛み行動の性差発現における分界条床核背外側CRHニューロンの役割

纹状体核背外侧CRH神经元在疼痛行为性别差异表达中的作用

基本信息

批准号：
20K07747
负责人：
萩原裕子
金额：
$ 2.83万
依托单位：
St. Marianna University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでの研究で、痛み刺激としてホルマリンテストを行い、一度痛みが抑制される時期に性差が認められること、その時期に分界条床核外側部で雌性特異的にCREBのリン酸化が起こることを明らかにした。また、同部位はCorticotropin-releaseing hormone(CRH)ニューロンが局在している特異的な場所でもある。本研究の目的は、分界条床核外側部のCRHニューロンが、痛み行動の性差発現にどのような役割を演じているか、を検討することにあり、遺伝子改変動物とウィルスベクターを組み合わせて利用し、オプトジェネティクスやTRECKの変法などの神経細胞に選択的な操作技術を用いる。性差発現は、ホルマリンテストによる痛み反応の場合、中間相という限定した時間にのみ顕著なため、オプトジェネティクスなどの時間分解能に優れた方法が有効となる。本研究ではCRH-Creラット（RRRC#00852)を使用し、分界条床核外側部におけるCRHニューロンを選択的に操作することにより、ホルマリンテスト行動への変容について検討した。ラットの分界条床核外側部に脳定位固定装置を用いて、AAV-EF1a-DIO- hChR2(C128s/D156A)-EYFP 、AAV-EF1a-DIO-eNpHR3.0-EYFP を投与し、同時に、光ファイバーの先端を固定した。手術１ヶ月後、ホルマリンテストを行い、光ファイバーの先端から特定波長の光を照射しCRHニューロンを興奮、もしくは抑制させ、行動の変化を観察する予定であった。しかし、使用したウィルスの発光力が弱く感染した細胞がCRHニューロンであるかどうかの同定が難しくなった。そのため、使用するウィルスを再検討する必要があり時間を要し2022年度が終了した。

在之前的研究中，我们进行了福尔马林试验作为疼痛刺激，发现疼痛被抑制的时期存在性别差异，并且在女性特有的该时期纹状体核外侧部分发生了CREB磷酸化。方式透露。该区域也是促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）神经元定位的特定位置。本研究的目的是结合转基因动物和病毒载体，利用神经元选择性操作技术，研究树纹外侧部分的 CRH 神经元在疼痛行为性别差异表达中的作用。如光遗传学和 TRECK 的修饰。对于福尔马林测试引起的疼痛反应，性别差异仅在有限的时间内（称为间期）才会明显，因此具有出色时间分辨率的方法（例如光遗传学）是有效的。在本研究中，我们使用 CRH-Cre 大鼠 (RRRC#00852)，通过选择性操纵纹状体核外侧部分的 CRH 神经元来研究福尔马林测试行为的转变。使用立体定位仪将AAV-EF1a-DIO-hChR2(C128s/D156A)-EYFP和AAV-EF1a-DIO-eNpHR3.0-EYFP施用于大鼠纹状体核的外侧部分，同时，光纤的尖端被固定。手术后一个月，计划进行福尔马林试验，从光纤尖端照射特定波长的光来兴奋或抑制CRH神经元，并观察行为的变化。然而，所用病毒的发光能力较弱，导致很难识别被感染的细胞是否是CRH神经元。因此，需要重新考虑要使用的病毒，这需要时间，2022财年就结束了。

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Sex differences in pain-induced modulation of corticotropin-releasing hormone neurons in the dorsolateral part of the stria terminalis in mice

疼痛引起的小鼠终纹背外侧促肾上腺皮质激素释放激素神经元调节的性别差异

DOI：
10.1016/j.brainres.2021.147688
发表时间：
2021-10-10
期刊：
Brain Research
影响因子：
2.9
作者：
H. Hagiwara;K. Sakimura;M. Abe;K. Itoi;Y. Kamiya;T. Akema;T. Funabashi
通讯作者：
T. Funabashi

Sex differences in pain-induced modulation of corticotropin-releasing hormone neurons in the dorsolateral part of the stria terminalis in mice

疼痛引起的小鼠终纹背外侧促肾上腺皮质激素释放激素神经元调节的性别差异

DOI：
10.1016/j.brainres.2021.147688
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
2.9
作者：
Hagiwara Hiroko;Sakimura Kenji;Abe Manabu;Itoi Keiichi;Kamiya Yoshinori;Akema Tatsuo;Funabashi Toshiya
通讯作者：
Funabashi Toshiya