Smads活性化因子Hgs/Hrsの細胞増殖がん化における役割

Smads 激活剂 Hgs/Hrs 在细胞增殖和癌变中的作用

基本信息

批准号：
13216007
负责人：
浅尾裕信
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216007/
关键词：
Hgs Hrs サイトカイン情報伝達 Smad

项目摘要

我々はインターロイキン2やGM-CSFによりチロシンリン酸化される分子としてFYVEfinger分子Hgsを遺伝子単離した。その機能を調べるためにHgs遺伝子ホモ変異マウスを作成したところ、胎生期10.5日以内に死亡した。このメカニズムとして、HgsはSmad2やSmad3分子と直接会合し、これらSmadsをアクチビン受容体に効率よく会合させる機能を有することを発見し、Hgsの変異がアクチピン受容体からの情報伝達不全を引き起こしていることを証明した。Smad2、Smad4は癌抑制遺伝子として働いていることが明らかにされている。従って、我々はSmads活性化に重要なHgsもまた癌抑制遺伝子として機能している可能性を想定し、その検討のためにCre-loxPシステムを用いたHgsコンディショナルノックアウトマウスを作成しようと試みている。ドミナントネガティブHgsがアクチビン以外にもSmad活性化シグナルを抑制するかどうかを調べた結果、TGF-βとともにBMPのシグナルも抑制する可能性を見出した。Hgsと同様FYVEfingelドメインを持つSARAのドミナントネガティブ分子(SARA DN)がTGF-βのシグナルを強く抑制することは報告されているが、我々はSARADNのBMPシグナルに対する抑制作用は非常に弱いという結果を得ており、それらFYVEfingerドメイン分子のSmad活性化における使い分けがある可能性もある。Hgsコンディショナルノックアウトマウス作成の過程で、Hgs発現量の極めて低い細胞株を樹立することが出来た。しかし、この細胞株ではTGF-βやBMPのシグナル伝達に明らかな異常は認められていない。現在、この細胞にCreを発現させ、完全にHgsを欠失した細胞株を得ようとしているところである。

我们分离出 FYVEfinger 分子 Hgs，该分子是由 IL-2 和 GM-CSF 酪氨酸磷酸化的分子。当我们培育出 Hgs 基因纯合子小鼠来研究其功能时，它在胚胎期 10.5 天内死亡。作为其机制，我们发现Hgs直接与Smad2和Smad3分子结合，并具有将这些Smad与激活素受体有效结合的功能，并且Hgs的突变导致激活素受体的信息传递缺陷。已揭示Smad2和Smad4具有抑癌基因的功能。因此，我们推测对Smads激活很重要的Hgs也可能起到肿瘤抑制基因的作用，为了研究这一点，我们尝试使用Cre-loxP系统创建Hgs条件敲除小鼠。通过研究显性失活 Hgs 是否会抑制激活素以外的 Smad 激活信号，我们发现它可能会抑制 BMP 信号以及 TGF-β。尽管有报道称SARA显性失活分子（SARA DN）与Hgs一样具有FYVEfingel结构域，可强烈抑制TGF-β信号，但我们发现SARADN对BMP信号的抑制作用可能非常弱。 FYVEfinger 结构域分子在 Smad 激活中的使用方式不同。在创建Hgs条件敲除小鼠的过程中，我们能够建立Hgs表达极低的细胞系。然而，在此细胞系中未观察到 TGF-β 或 BMP 信号转导的明显异常。我们目前正在尝试通过在这些细胞中表达Cre来获得完全缺乏Hgs的细胞系。