STAM1・STAM2二重欠損マウスにおけるT細胞分化異常の研究

STAM1/STAM2双缺陷小鼠T细胞分化异常的研究

基本信息

批准号：
13037001
负责人：
浅尾裕信
金额：
$ 2.94万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13037001/
关键词：
STAM1 2 サイトカイン情報伝達 T細胞特異的遺伝子欠損マウスアポトーシス

项目摘要

我々はIL-2情報伝達系の解析から共通受容体γc鎖を同定し、そこにJak3チロシンキナーゼが会合し細胞内シグナル伝達に関わっていることを報告してきた。その下流の情報伝達経路を調べる目的でIL-2刺激後チロシンリン酸化される分子を検索し、Jak3やJak2に会合する新規アダプター分子STAM1/2を単離した。これらSTAM1/2のin vivoでの機能を調べるためにそれぞれの欠損マウスを作成したところ、STAM1、STAM2のいずれの欠損マウスも免疫系に異常を認めなかった。そこでSTAM1/2の二重欠損マウスを作成したところ、二重欠損マウスは胎生11.5日までに全て死亡した。本研究では、STAM1loxP/loxPSTAM2-/-マウスを作成し、lck-Cre遺伝子導入マウスと交配することにより胸腺特異的STAM1/2二重欠損マウスSTAM1/2DKOを得、STAM1/2の胸腺細胞分化増殖における機能的役割を解析した。STAM1/2DKOの胸腺は小さく、胸腺細胞数は明らかに減少していた。特にCD4SP、CD8SP細胞が著明に減少し、末梢のT細胞もほとんど見られなかった。IL-2やIL-7存在下あるいは非存在下でのTCR刺激後のCD4SP胸腺細胞の反応を調べた結果、DNA合成能はSTAM1/2DKOで明らかに低下していたが、STAT5、ERK、AKTの活性化やc-myc誘導能には差が認められなかった。しかしp38MAPKとJNKの活性化が遷延化する傾向がみられ、STAM1/2DKO胸腺細胞の分化障害に関与する可能性が示された。このようにSTAM1/2は胸腺細胞の分化、増殖あるいは生存に重要な機能を持つことが示された。

我们通过分析IL-2信号系统确定了常见的受体γC链，并报道JAK3酪氨酸激酶与其相关，并参与细胞内信号传导。为了研究下游信号通路，搜索了IL-2刺激后被酪氨酸磷酸化的分子，并分离了与JAK3和JAK2相关的新型适配器分子Stam1/2。为了研究这些STAM1/2的体内功能，创建了每个缺陷的小鼠，并且既没有stam1和Stam2缺乏小鼠，均未发现免疫系统中的异常。因此，为Stam1/2创建了双缺陷小鼠，所有双缺陷小鼠的胚胎生命为11.5天。在这项研究中，制备了stam1loxp/loxpStam2 - / - 小鼠，并通过与LCK-CRE转基因小鼠交配获得胸腺特异性的stam1/2双缺陷小鼠stam1/2dko，并分析了stam1/2在胸腺细胞增殖中的stam1/2的功能作用。 stam1/2dko的胸腺很小，胸腺细胞的数量明显减少。特别是，CD4SP和CD8SP细胞显着降低，并且很少看到周围T细胞。在存在或不存在IL-2或IL-7的情况下TCR刺激后，在Stam1/2DKO中明显降低了DNA合成能力，但是在Stat5，ERK和AKT或AKT或诱导C-MYC的激活中没有发现差异。但是，p38mapk和JNK的激活趋于延长，表明可能参与Stam1/2DKO胸腺细胞的分化受损。因此，已经表明，stam1/2对于胸腺细胞分化，增殖或存活具有重要功能。