ゲノム維持機構におけるATMファミリーの機能とその異常による発がん機構の解析

ATM家族在基因组维持机制中的功能及其异常引起的致癌机制分析

• 批准号: 13214038
• 负责人: 山本 健一
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214038/
• 关键词: 細胞周期; ATM; ATR; 遺伝子ノックアウト; トリDT40細胞; DNA損傷; Arg; Rad51

我々は,ATMの重要な標的因子の一つのc-Ablは,そのノックアウト細胞の角蜥から,ATMのDNA修復機能には関与していないことを明らかにしたが,最近c-Ablファミリーの一員で機能が明らかではないArg(Abl related gene)について,そのノックアウト細胞がATMノックアウト細胞と同じように,Rad51focus形成,放射線感受性,DNA組み換えや修復,等の異常を示し,さらに,ATM依存的に活性化されたArgがRad51と結合してチロシン燐酸化することから,ATMのDNA修復機能にArgが関与していることを明らかにした(論文準備中).DT40でのノックアウトが致死的であったATMファミリーのATRのノックアウトついては,Cre-loxP系を使ったノックアウトとATRの涯渡変異体のノックインの共同研究を進めている.さらに,最近Cambridge大Jackson教授のグループが出芽酵母Mec1にDNAとともに結合している因子として生化学的に同定したlcd1について,DT40細胞での遺伝子ノックアウトによる機能解析を共同研究で進めている.従来,放射線等のDNA損傷によるJNK活性化には,ATMおよびc-Ablが重要であると考えられていた.しかし,ATM, c-Abl、及びArgのDT40ノックアウト細胞での解析では,放射線等によるJNK活性化は正常あるいは亢進していた.一方,DNA-PKおよびKu70ノックアウト細胞(京大武田教授・放医研阿部博士)では,放射線等によるJNK活性化が認められず,また放射線によるアポトーシスも極度に低下していた.従ってDT40等のB細胞系の細胞では,放射線等によるJNK活性化やアポトーシスにはDNA-PK/Ku70が重要であると考えられ,BTKを含め,DNA-PKの下流のシグナル因子の同定を現在進めている.

我们已经透露，C-ABL是ATM的关键目标因素之一，与ATM的DNA修复功能无关，但最近它的功能尚不清楚，并且是C-ABL家族的一部分。敲除细胞表现出异常，例如RAD51FOCUS形成，辐射敏感性，DNA重组和修复，类似于ATM基因敲除细胞，并且还揭示了以ATM依赖性方式激活的ARG与RAD51结合并与RAD51结合，并且是酪氨酸磷酸化的，表明ARG与DNA修复功能有关（在Atms中的DNA修复功能）。关于ATM家族中ATR的淘汰赛，DT40的淘汰赛是致命的，Cre-Lo目前正在使用XP系统和ATR-Transition突变体的敲除敲除。此外，剑桥大学教授杰克逊（Jackson）教授最近一直在对LCD1的功能分析进行联合研究，该研究在生化上被鉴定为与DT40细胞中基因敲除DNA结合的因素。以前，由于DNA损伤（例如辐射），ATM和C-ABL被认为对JNK激活很重要。但是，ATM和C-ABL被认为很重要。 DT40基因敲除细胞中C-ABL和ARG的分析表明，辐射和其他因素的JNK激活正常或增加。同时，未观察到DNA-PK和KU70基因敲除细胞（Takeda教授，京都大学，ABE博士），辐射和其他因素的JNK激活，并且辐射引起的凋亡也极大地降低了。因此，DNA-PK/KU70被认为对于辐射的JNK激活和凋亡至关重要，而B细胞系（例如DT40）中的其他因素很重要，我们目前正在努力鉴定包括BTK在内的DNA-PK下游的信号因子。

项目成果

Arimura, Y. et al.: "CD45 is required for CD4O-induced inhibition of DNA synthesis and regulation of c-Jun NH 2-terminal kinase and p38 in BAL-17 B cells"J. Biol. Chem.. 276. 8550-8556 (2001)

Arimura, Y. 等人：“CD4O 诱导的 DNA 合成抑制以及 BAL-17 B 细胞中 c-Jun NH 2 末端激酶和 p38 的调节需要 CD45”。