DNA修復経路と細胞内物質輸送を標的とした口腔がん治療法の開発

针对DNA修复途径和细胞内物质转运的口腔癌治疗方法的开发

• 批准号: 19K10272
• 负责人: 桐田 忠昭
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K10272/
• 关键词: DNA修復; 口腔がん; ATR inhibitor; 細胞周期; PIKKファミリー; ATR; ATR阻害剤; 5-FU; ATM; Chk1; γH2AX; DNA損傷; DNA修復タンパク; ATR経路阻害; がん増感; 放射線治療; 抗がん薬

これまで、PIKKファミリーを中心としたDNA修復機構の制御により、口腔がん治療における放射線や抗がん剤などの既存の治療において増感効果を生じるのか否かを検討している。これまでの研究で、特に著明な増感を認めたATR阻害剤による5-FU増感効果に関するメカニズムの解明を進めており、ウエスタンブロッティングにて5-FUの濃度依存性にATRの自己リン酸化が強く進み、ATR阻害剤を加えることによりそれらのATRのリン酸化は抑制されることを確認している。また、γH2AX抗体を用いて免疫染色を行うことで、ATR阻害により5-FUによるDNA二本鎖切断を増加させ効率的なアポトーシスを誘導し増感効果をもたらすと考えられた。ATRは、DNA二本鎖切断の修復における相同組み換えでの修復中心的な役割を果たし、その修復は細胞周期のS/G2期に依存的であるため、細胞周期の変動や細胞周期に関わる遺伝子発現に変化を認めるか否かの解析を中心に研究を進めている。5-FU処理により細胞周期がS期で停止していることが明らかとなり、5-FUとATR阻害剤の併用でSub-G1の割合が増加していることが明らかとなった。また、5-FU処理後の遺伝子発現変動をRNA sequenceにて定性的に、qPCRにて定量的に行った。その結果、有意な発現変動を認めた9種の遺伝子はCCNE1、CCNE2、CDKN1A、TXNIP、CCNB1、CDKN3、AURKA、CDC20、PSRC１であり、S期以降で細胞周期停止に働く傾向の遺伝子の発現であった。AURKAの発現抑制が認められ、ATRはAurora Aの活性を受けてセントロメア領域にリクルートされて染色体分配時の安定性に寄与しているることから、ATR阻害剤と5-FU増感効果のメカニズムとして染色体分配時への影響、染色体の崩壊などが考えられた。

到目前为止，我们一直在考虑是否通过控制DNA修复机制（主要在Pikk家族中），是否通过控制口腔癌治疗中现有治疗的敏感性（例如放射线和抗癌药物）。先前的研究一直在努力阐明ATR抑制剂5-FU敏化作用的机制，ATR抑制剂特别值得注意，Western印迹证实，ATR的自磷酸化以5-FU的浓度依赖性的5-FU进行了强烈进展，并且ATR抑制剂的添加抑制了这些磷酸化的磷酸化。此外，认为使用γH2AX抗体进行免疫染色会增加由5-FU引起的DNA双链断裂，通过抑制ATR，诱导有效的细胞凋亡，从而提高敏感性。 ATR在DNA双链断裂的修复中在同源重组中起着核心作用，并且由于其修复取决于细胞周期的S/G2相，因此我们正在进行研究，重点是分析细胞周期的波动和基因表达的变化是否与细胞周期相关。 5-FU治疗表明，细胞周期是在S期停止的，当使用5-FU和ATR抑制剂组合使用5-FU和ATR抑制剂时，SUB-G1的比例增加。此外，通过RNA序列定性地进行5-FU处理后的基因表达波动，并通过qPCR进行定量。表现出显着表达变化的九个基因是CCNE1，CCNE2，CDKN1A，TXNIP，CCNB1，CCNB1，CDKN3，AURKA，CDC20和PSRC1，并表示为倾向于在S​​相后在细胞周期中作用的基因。观察到了Aurka表达的抑制，并将ATR募集到具有Aurora A活性的丝粒区域，从而有助于染色体分布期间的稳定性，并且ATR抑制剂和5-FU敏化作用的机制被认为对染色体分布和染色体受影响。

项目成果

Requests and Expectations from JSOMS to JSOI

JSOMS 对 JSOI 的请求和期望

• DOI: 10.11237/jsoi.35.182
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Japanese Society of Oral Implantology
• 作者: Hasegawa Takumi;Kakei Yasumasa;Yamakawa Nobuhiro;Kirita Tadaaki;Okura Masaya;Naruse Tomofumi;Otsuru Mitsunobu;Yamada Shin‐ichi;Kurita Hiroshi;Hirai Eiji;Rin Shin;Ueda Michihiro;Umeda Masahiro;Akashi Masaya;Japan Oral Oncology Group (JOOG);桐田 忠昭
• 通讯作者: 桐田 忠昭

早期舌扁平上皮癌における頸部リンパ節転移に関する検討～多施設共同研究の結果から～

早期舌鳞状细胞癌颈部淋巴结转移的研究~多中心联合研究结果~

• 发表时间: 2022
• 作者: 山川 延宏;桐田 忠昭;梅田 正博 ;柳本 惣市;大倉 正也;太田 嘉英;大鶴 光信;栗田 浩;山田 慎一 ;明石 昌也 ;長谷川 巧実 ;上田 倫弘
• 通讯作者: 上田 倫弘

口腔がん細胞における選択的ATR阻害による温熱増感効果の検討

选择性 ATR 抑制对口腔癌细胞的热敏化作用的检测

• 发表时间: 2021
• 作者: 伊藤宗一郎;仲川洋介;桐田忠昭
• 通讯作者: 桐田忠昭

口腔潜在的悪性疾患(OPMDs)の癌化におけるPD-1/PD-L1免疫チェックポイント分子の役割

PD-1/PD-L1免疫检查点分子在口腔隐匿性恶性疾病（OPMD）癌变中的作用

• 发表时间: 2019
• 作者: 舟山直希;柳生貴裕;上田順宏;山川延宏;桐田忠昭
• 通讯作者: 桐田忠昭

Nivolumab治療中にpseudo-progressionを示した再発上顎歯肉癌の１例

纳武利尤单抗治疗期间出现假性进展的复发性上颌牙龈癌一例

• 发表时间: 2019
• 作者: 玉置盛浩;吉岡元;下村忠弘;小林厚;柳生貴裕;山川延宏;上田順宏;桐田忠昭
• 通讯作者: 桐田忠昭