口腔がんにおける重粒子線照射によるp53非依存アポトーシスのメカニズムの解明

重离子束照射诱导口腔癌p53非依赖性细胞凋亡机制的阐明

• 批准号: 21659472
• 负责人: 桐田 忠昭
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659472/
• 关键词: p53; アポトーシス; 重粒子線; Caspase; 生存シグナル; p53; アポトーシス; 重粒子線; Caspase; 生存シグナル

我々は、これまで変異型p53遺伝子を有するヒト歯肉扁平上皮癌細胞における高LET重粒子線(鉄線および炭素線)とX線の殺細胞効果及びアポトーシス誘導を調査し、重粒子線はたとえ変異型p53遺伝子を有するがん細胞においてもX線と比較して少ない線量で効率的にアポトーシスを誘導し感受性が高くなることを明らかにした。さらに、重粒子線によるアポトーシスはCaspase依存の経路を通っており、Caspase阻害剤を用いた実験によりCaspase8経路ではなくCaspase9経路を選択的に通りCaspase3を活性化しアポトーシスを誘導する可能性があることを明らかにし、炭素線を照射した細胞では、生存シグナルが抑制されることによりアポトーシスが誘導される可能性を考え、生存シグナルのメカニズムを明らかにするため、生存シグナルに関与するタンパク質をwestern blot法にて解析した。X線照射を行った細胞よりも、鉄線を照射した細胞でmTORおよびp70S6さらにCaspase9を抑制するAktが抑制され生存シグナルが抑制されるだけではなく、同時にアポトーシス経路を活性化することを明らかにした。本年度は、さらに放射線照射によって、Akt-mTORシグナル系に関連するタンパク質量は照射2-3時間後をピークにいずれも減少していることを明らかにした。さらに、等線量(2Gy)照射において、X線よりも鉄線を照射した場合の方がAkt、リン酸化Akt、mTOR、rpS6、リン酸化rpS6、Survivinいずれも細胞内タンパク質量が効率的に減少していること、等生存線量(X線:7Gy、鉄線:2Gy)においてもX線よりも鉄線を照射した場合の方がAktが減少しており、それによりアポトーシスが促進されていることが明らかとなった。

我们已经研究了携带突变体p53基因的人牙龈鳞状细胞癌细胞中高质LET重离子束（铁和碳导线）和X射线的细胞杀伤作用和凋亡诱导，并显示了重离子束有效地诱导X射线射击，并且对X射线造成了X射线的敏感性更大，甚至对X射线contry contreant contreant prokant conten conten conte to to to to to kente to to to to to to to to to kent to to kente s-rays p53。此外，由重离子束引起的凋亡通过caspase依赖性途径，使用caspase抑制剂的实验表明，它可以选择性地通过CASPASE9途径，而不是激活caspase8途径激活Caspase3并诱导细胞凋亡。考虑到可以在用碳梁照射的细胞中诱导细胞凋亡的可能性，以阐明生存信号的机理，使用Western blot方法分析了与生存信号有关的蛋白质。据揭示，不仅抑制MTOR和P70S6和CASPASE9的AKT在铁辐照的细胞中抑制了AKT，而且还抑制了生存信号，而且同时激活了凋亡途径。今年，我们进一步揭示了与Akt-MTOR信号系统相关的蛋白质量在照射后2-3小时达到峰值，并且都减少了。此外，当辐照异氧化物（2GY）时，所有Akt中的细胞内蛋白量，磷酸化的Akt，mTOR，RPS6，RPS6，磷酸化的RPS6和Survivin和Survivin且Survivin用铁丝而不是X射线辐射时，并在Inty irien the Itgy iN ate irien the Itgy the irien gy时（x-ray gy）（x-rays）（x-rays），有效地降低，x-ray e e e x-ray e e e nir the，凋亡被促进。