シグナルモジュレーターとしてのFKBPシャペロンの役割

FKBP 伴侣作为信号调制器的作用

• 批准号: 11153208
• 负责人: 山本 健一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11153208/
• 关键词: シグナル伝達; 転写因子; インヒビター; リン酸化; 蛋白分解; 免疫抑制剤; ユビキチン; プロテアソーム

免疫抑制剤FK506によるNF-κB活性化の機序を明らかにするため、そのインヒビターのIκBαの分解について解析した。その結果、その分解は、IκBαのN末部の32番目と36番目のセリン残基(Seri32/Ser-36)に依存し、従来指摘されていたプロテアソームが関与していることを確かめた。さらに、Ser-32で燐酸化されたIκBαに対する特異抗体を用いてウェスタンブロットした結果、FK506がIκBαのSer-32の緩徐な燐酸化を引き起こすことが確認された。しかし、FK506はJNKの強い活性化を引き起こすにも関わらず、FK506によるIκB Kinase(IKK-1/-2)の活性化は認められなかった。また、IL-1によるIκBαの分解では、N末部のセリン残基の燐酸化に依存したN末部の21番目と22番目のリジン残基(Lys-21/Lys-22)へのユビキチン化が必須であるが、FK506によるIκBαの分解はこのN末部のユビキチン化部位に依存しないで起こった。以上、FK506によるIκBαの分解は、従来考えられている機構とは異なり、N末部のセリン残基の燐酸化には依存するが、N末部のユビキチン化部位には依存しないプロテアソーム蛋白分解機構によって起こると考えられた。現在我々は、FK506/FKBPによって活性化される新規IKKとFK506/FKBPによって抑制されるフォスファターゼの同定を進めている。

为了阐明免疫抑制剂FK506的NF-κB激活机制，分析了其抑制剂IκBα的降解。结果，已经证实，降解取决于IκBα（Seri32/Ser-36）N端的丝氨酸残基32和36，该末端先前指出了蛋白酶体。此外，使用针对SER-32磷酸化IκBα的特异性抗体的蛋白质印迹证实，FK506会导致IκBαSer-32的缓慢磷酸化。然而，尽管FK506引起了JNK的强大激活，但未观察到FK506激活IκB激酶（IKK-1/-2）。 Furthermore, degradation of IκBα by IL-1 requires ubiquitination to the lysine residues 21st and 22nd lysine residues (Lys-21/Lys-22) at the N-terminus, dependent on phosphorylation of serine residues at the N-terminus, but degradation of IκBα by FK506 independently depends on the ubiquitination site at the N-terminus.与常规机制不同，上述IκBα被认为是IκBα的降解，它取决于N末端处丝氨酸残基的磷酸化，但被认为是由N-Terminus在N-Terminus泛素化位点不依赖蛋白酶体的蛋白水解机制引起的。目前，我们正在开发FK506/FKBP激活的新型IKK和FK506/FKBP抑制的磷酸酶。

项目成果

Koyano, S., et al.: "A novel Jun N-terminal kinase (JNK)-binding protein that enhances the activation of JNK by MEK kinase 1 and TGB-β-activated kinase 1"FEBES Letters. 457. 385-388 (1999)

Koyano, S. 等人：“一种新型 Jun N 末端激酶 (JNK) 结合蛋白，可增强 MEK 激酶 1 和 TGB-β 激活激酶 1 对 JNK 的激活”FEBES Letters，第 457 页，第 385-388 页。 (1999)

Takao, N. et al.: "c-Ab1 tyrosine kinase is not essentia ATM function in chromosomal maintence"J. Biol. Chem.. 275. 725-728 (2000)

Takao, N. 等人：“c-Ab1 酪氨酸激酶不是染色体维持中 ATM 功能的必需品”J.

Zhang, Y., et al.: "Immunosuppressant FK506 activates NF-κB through the proteasome-mediated degradation of IκBα : requirement for N-terminal phosphorylation but not ubiquitination sites"J. Biol. Chem.. 274. 34657-34662 (1999)

张，Y.，等人：“免疫抑制剂 FK506 通过蛋白酶体介导的 IκBα 降解激活 NF-κB：需要 N 末端磷酸化，但不需要泛素化位点”J. Biol. 274. 34657-34662 (1999) ）

Morrion, C., et al.: "The controlling role of ATM in recombinational repair of DNA damage"EMBO J.. 19. 463-471 (2000)

Morrion, C., et al.：“ATM 在 DNA 损伤重组修复中的控制作用”EMBO J.. 19. 463-471 (2000)

Kawai, H., et al.: "Downregulation of NF-κB is required for p53-dependent apoptosis in X-irradiated mouse lymphorma cells and thymocytes"Cencer Res.. 59. 6038-6041 (1999)

Kawai, H., et al.：“X 射线照射的小鼠淋巴瘤细胞和胸腺细胞中 p53 依赖性细胞凋亡需要下调 NF-κB”Cencer Res.. 59. 6038-6041 (1999)