制がん剤耐性獲得の多様な分子機構と耐性克服法の開発

获得抗癌药物耐药性的各种分子机制和克服耐药性方法的开发

基本信息

批准号：
01015090
负责人：
桑野信彦
金额：
$ 3.07万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

制がん剤耐性獲得に関与する機構の多様性を把握するために、我々は様々な制がん剤に対する耐性がん細胞株を樹立し、関与する耐性因子を検索した。同時に耐性因子を標的にした耐性克服法を開発する仕事を進めた。その結果、1.多剤耐性遺伝子mdrー1の発現に重要なプロモーター及びエンハンサー領域を単離し、ビンクリスチンをはじめとする制がん剤によってmdrー1遺伝子の発現が促進することを見出した。2.mdrー1遺伝子産物GP170を標的にしてジピリダモールならびに数多くのジハイドロピリジン系薬剤の中から培養系及び動物実験系で耐性克服する組合せを見出した。3.シスプラチン耐性株を樹立した。耐性株において親株に較べグルタチオンSートランスフェラーゼ(GST)が数倍上昇していること、さらに感受性復帰変異株においてGST活性が再び元に戻っていることを観察した。4.GSTーpiのcDNAを導入した株でGSTーpiが数倍上昇しており、2ー3倍のシスプラチン耐性を獲得することを見出した。5.エトポシドVPー16やテニポシドVMー26に対する50ー100倍の耐性株を単離し、DNAトポイソメラーゼII及びVPー16/VMー26の透過性が変化していることを観察した。今後、mdrー1遺伝子のプロモーター領域に結合する転写因子を明らかにするとともに、制がん剤による転写調節機構を把握したい。また、シスプラチン耐性についてはGST以外の耐性因子の同定ならびにVPー16/VMー26耐性を左右するDNAトポイソメラーゼの役割についての解析を進めていきたい。

为了了解获得抗癌药物耐药性的机制的多样性，我们建立了对各种抗癌药物具有耐药性的癌细胞系，并寻找相关的耐药因子。与此同时，我们致力于开发针对阻力因素来克服阻力的方法。结果，1.我们分离出了多药耐药基因mdr-1表达重要的启动子和增强子区域，发现长春新碱等抗癌药物可以促进mdr-1基因的表达。 2.针对mdr-1基因产物GP170，我们在培养和动物实验中发现了双嘧达莫与多种二氢吡啶类药物的组合，可以克服耐药性。 3.建立顺铂耐药菌株。我们观察到，与亲本菌株相比，抗性菌株中的谷胱甘肽S-转移酶（GST）增加了数倍，而敏感回复菌株中的GST活性恢复到其原始水平。 4.我们发现导入GST-pi cDNA的菌株中GST-pi增加数倍，并且它们获得的顺铂耐药性高出2-3倍。 5.我们分离出对依托泊苷VP-16和替尼泊苷VM-26耐药50-100倍的菌株，并观察DNA拓扑异构酶II和VP-16/VM-26通透性的变化。未来，我们希望阐明与mdr-1基因启动子区域结合的转录因子，并了解抗癌药物的转录调控机制。关于顺铂耐药，我们希望识别 GST 以外的耐药因素，并分析影响 VP-16/VM-26 耐药的 DNA 拓扑异构酶的作用。