多剤耐性骨肉腫細胞株の作成と薬剤選択および投与法による耐性克服の研究

建立多重耐药骨肉瘤细胞系并通过药物选择和给药方法克服耐药性的研究

• 批准号: 15790796
• 负责人: 村田 博昭
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790796/
• 关键词: 骨肉腫; 化学療法; 耐性; ビスフォスフォネート; 多剤耐性

昨年度までにマウス骨肉腫細胞株に第3世代のビスホスフォネート製剤(インカドロネート、ミノドロネート)を投与しin vitroでの腫瘍増殖抑制効果を報告した。本年度は腫瘍増殖抑制の原因について検討した。これらの薬剤は濃度・時間依存性にRap1のプレニル化を阻害し、細胞周期において、S期の細胞比率の増加を認めた。また、DAPIによる核染色で核の濃染・アポトーシス小体を認め、TUNEL陽性細胞比率は時間依存性に増殖してアポトーシスを誘導していることがわかった。次に、ドキソルビシン耐性株に対するビスホスフォネートの増殖抑制効果について耐性度(親株と耐性株のIC50値の比率)を比較検討した。高濃度で親株であるMOSとほぼ同様の効果を示したが、ドキソルビシンに対する耐性度とビスホスフォネートに対する耐性度はほぼ同様であった。さらに、増殖抑制効果を高める目的で、ビスホスフォネートに他の抗癌剤と併用させ相乗効果の有無について検討した。抗癌剤としては現在骨肉腫の治療に用いられているDoxorubicin、Cisplatin、Methotrexateに加えて、他の癌腫などで使用されているPaclitaxel、Gemcitabeneなどを用いた。現在骨肉腫の治療に用いられている薬剤との併用効果は認めなかった。しかし、Paclitaxel、Gemcitabineとは併用効果を認めたことから、BPsと他の薬剤を併用することで低濃度の薬剤での効果、臨床未使用薬剤の効果、耐性克服などの可能性があると考えた。

去年，我们对小鼠骨肉瘤细胞系施用第三代双膦酸盐（英卡膦酸盐、米诺膦酸盐），并报告了其体外肿瘤生长抑制作用。今年，我们研究了肿瘤生长抑制的原因。这些药物以浓度和时间依赖性方式抑制 Rap1 异戊二烯化，并且观察到处于细胞周期 S 期的细胞比例增加。此外，DAPI的核染色显示出强烈的核染色和凋亡小体，表明TUNEL阳性细胞的比例以时间依赖性方式增殖并诱导细胞凋亡。接下来，我们比较了双膦酸盐对阿霉素耐药菌株的生长抑制作用的耐药程度（亲本菌株与耐药菌株之间的IC50值之比）。在高浓度下，它表现出与亲本菌株MOS几乎相同的效果，但其对阿霉素和双膦酸盐的耐药性几乎相同。此外，为了增强抗增殖作用，将双膦酸盐与其他抗癌药物联合使用，以检验它们是否具有协同作用。使用的抗癌药物包括目前用于治疗骨肉瘤的阿霉素、顺铂和甲氨蝶呤，以及用于治疗其他癌症的紫杉醇和吉西他本。与目前用于治疗骨肉瘤的药物联合使用，未观察到疗效。然而，由于观察到紫杉醇和吉西他滨的联合作用，我们认为BPs和其他药物的联合可能在低浓度下有效，可能对尚未在临床试验中使用过的药物有效，并且可能克服Ta耐药性。 。