心停止ドナーからの肝臓移植法の開発

心脏骤停供体肝移植方法的开发

基本信息

批准号：
12357008
负责人：
藤堂省
金额：
$ 21.29万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

心停止ドナーで最も大きな障害となる温阻血再灌流障害は肝臓の微小循環障害を契機として肝機能不全を惹起する。この微小循環障害は肝類洞内皮障害に基づくものであり、アデノシンA1受容体・エンドセリン-1A受容体・アンギンテンシンII type I受容体等の拮抗剤で改善されることを明らかにしてきた。これらの受容体にリガンドが結合するとinhibitor small G proteinがリン酸化され細胞内セカンドメッセンジャーであるサイクリックAMPを減少させる。そこでサイクリックAMPの分解酵素であるホスホジエステラーゼIIIの阻害剤を投与し細胞内サイクリックAMPの濃度を虚血再灌流時にも減少させないようにすれば障害が緩和されるのではないかという仮説をたてた。ビーグル犬の肝臓に流入する血流を2時間完全に遮断し温阻血モデルを作成した。動物は以下の4群(n=6)に分類した。Group 1、薬剤非投与群;Group 2、温阻血1時間前にホスホジエステラーゼIII阻害剤投与;Group 3、2時間温阻血再灌流後1時間ホスホジエステラーゼIII阻害剤投与;Group 4、温阻血前後各々1時間ホスホジエステラーゼIII阻害剤投与。Group 2とGroup 3の動物は全例2週間以上生存したがGroup 1は33%が2週間生存しGroup 4は全例実験中の低血圧が原因で死亡した。生存グループでは血流再灌流後15分の時点でコントロール群に比べ約50%サイクリックAMP組織濃度が高値でありレーザードップラー血流計で測定した肝微小循環は生存グループでは温阻血前値に比べほぼ同等であったのに対しコントロール群では30%台にまで低下していた。現在この大動物での実験結果を基にしてラット肝灌流モデルを用い細胞内サイクリックAMPシグナル増強の臓器保護効果機構を転写因子レベルで解析中である。

心脏骤停地牢的最重大残疾，一种出血性疾病，导致肝脏微循环疾病引起的肝功能障碍。这种微循环疾病已显示出基于肝脏内皮疾病，并通过诸如腺苷A1受体，内素1A受体和A型I型I型受体等拮抗剂改善。当配体与这些受体结合时，抑制剂小的G蛋白会磷酸化并减少Cyclick AMP，这是细胞内第二信使。因此，如果HOS HOD酯化酶III的抑制剂（即cyclick AMP的分解酶）也不会降低细胞内cyclick AMP的密度，即使在缺血性重新染色的情况下，也不会降低该疾病。流入小猎犬狗的肝脏的血流完全切开了两个小时，以创建温暖的抑制模型。将动物分为以下四组（n = 6）。第1组，非助手组；在热霍斯工作者III抑制前1小时；第2组和第3组动物在所有情况下存活了两周以上，但第1组存活了两周，在所有实验中由于低血压而死亡。在生存组中，血液流动后15分钟内的环状AMP组织浓度高于对照组，并将用激光多普勒血流测量的肝脏肝循环与生存组的前脑中的肝脏循环进行比较。虽然它几乎是等效的，但对照组降至30％。当前，基于这种大动物的实验结果使用大鼠肝灌注模型，并且正在分析转录因子水平上分析细胞内环状AMP信号增强的器官保护机制。