肝切除術後の胆汁性腹膜炎による肝再生障害におけるNO(一酸化窒素)の関与

NO（一氧化氮）参与肝切除术后胆汁性腹膜炎引起的肝再生受损

• 批准号: 07770977
• 负责人: 福原 賢治
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770977/
• 关键词: 敗血症; 肝障害; NO(一酸化窒素); 肝類洞腔容積; エンドトキシン; クッパー細胞; 類洞内皮細胞; 微小循環; 敗血症; 肝障害; NO(一酸化窒素); 肝類洞腔容積; エンドトキシン; クッパー細胞; 類洞内皮細胞; 微小循環

敗血症時にみられる肝障害の発症機序について、一酸化窒素(NO)の生成と肝類洞腔の変化に着目し実験的に検討した。盲腸結紮穿刺により作成した腹膜炎ラットでは、血清GPTおよびエンドトキシン(Et)が腹膜炎発症後6時間から上昇を始め、12時間後では有意となり、このモデルがEt血症を伴った肝障害を発症していることが明らかとなった。point counting法にて算出した肝類洞腔容積比は、6時間後に中心静脈域が、12時間後では門脈域が急激な増加を示した。抗iNOS(誘導型NO合成酵素)抗体と抗eNOS(内皮型NO合成酵素)抗体を用いて肝、肺の免疫染色を行うと、eNOSの発現は認められなかったものの、iNOSはKupffer細胞と肺胞マクロファージ(MΦ)に強く発現していた。一方、Etの腹腔内投与によるEt血症ラットでも肝類洞腔は同様に拡張しており、Et投与後6時間からKupffer細胞、単球:MΦにiNOSの発現を認め、特に肉芽を形成している部位にiNOS陽性細胞が多数認められた。さらに免疫電顕にて詳細に観察すると、iNOSはKupffer細胞、単球系細胞の胞体内にびまん性に発現していることが明らかとなった。これに対しeNOSは、類洞内皮細胞の主として細胞膜に強く発現していた。以上より、肝類洞腔の容積変化と肝障害との関連性が示されたが、この類洞腔の拡張は、敗血症による全身の循環障害に対して、肝血流量を維持する合目的的変化であると考えられる。類洞構成細胞におけるNOSの発現とその局在の意味は不明であるが、NOが肝微小循環の変化する場において直接産生されていることは、敗血症時の肝障害発症機序を検討する上で極めて興味深い所見と考えている。今後は、NOによる肝細胞膜脂質過酸化やKupffer細胞由来の各種サイトカインに注目し、さらなる検討を行う予定である。

实验研究了败血症期间看到的肝损伤的机制，重点是产生一氧化氮（NO）和肝弦正弦腔的变化。在通过结扎和穿刺盲肠产生的腹膜炎中，血清GPT和内毒素（ET）在腹膜炎发作后6小时开始增加，并在12小时后显着，表明该模型在Etemia伴随着肝脏损害。使用点计数方法计算得出的肝正正弦腔体积比显示了6小时后静脉区域突然增加，而在12小时后的门户区域则突然增加。当使用抗INOS（可诱导的NO合酶）抗体和抗ENOS（内皮NO合酶）抗体进行肝脏和肺免疫染色时，未观察到ENOS表达，但INOS在Kupffer细胞和肺泡巨噬细胞（M或）上强烈表达。另一方面，在接受ET腹膜腹膜内给药的埃及大鼠中，类似地扩张了肝弦曲腔腔，并在库普弗细胞和单核细胞中观察到iNOS的表达：从ET给药后6小时开始，M M或观察到许多Inos阳性细胞，尤其是在形成颗粒的部位。此外，使用免疫电子显微镜的详细观察结果表明，iNOS在库普弗细胞和单核细胞的内部膨胀表达。相反，eNOS主要在正弦内皮细胞的细胞膜中强烈表达。以上显示了肝弦腔腔和肝脏损伤的体积变化之间的关系，但是据信，正弦腔腔的扩张是响应于由脓毒症引起的全身性循环系统疾病而维持肝血流的有目的变化。 NOS表达及其在正弦细胞中的定位的含义尚不清楚，但我们认为在肝微循环变化的部位直接产生了NO，这在检查败血症期间肝损伤机理非常有趣。将来，我们计划进一步研究由NO和各种细胞因子衍生自库普弗细胞引起的肝细胞膜脂质过氧化。