癌浸潤・転移における中間径フィラメント蛋白質の役割解明

阐明中间丝蛋白在癌症侵袭和转移中的作用

基本信息

批准号：
12215170
负责人：
稲垣昌樹
金额：
$ 2.82万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215170/
关键词：
中間径フィラメントケラチン熱ショック蛋白質 TNF TRADD

项目摘要

ケラチン18と結合する蛋白質としてDnaJ/Heat shock protein 40(Hsp40)familyに属するMrj蛋白質およびTNF receptor 1-associated death domain protein(TRADD)を同定した。Mrjはco-chaperoneとして、ケラチン8・18フィラメント構築の制御を行い、細胞運動時のフィラメントのリモデリングに関与している。中間径フィラメントの構築は、これまで私共が解析を進めてきたリン酸化・脱リン酸化によってgeneralに制御されているが、新しく見出されたMrj-Hsp70による制御は、ケラチン8・18に特異的な制御システムであると考えられた。TRADDはケラチンが発現している上皮細胞では、Type1ケラチンに特異的に結合している。ケラチンやビメンチンなどの中間径フィラメントを発現していないSW13細胞にケラチン8・18やケラチン18のN末端(TRADD結合部位)を強制発現させ、TNFによるアポトーシス誘導への影響を見ると、コントロールベクターに比してケラチン8・18やケラチン18のN末端(TRADD結合部位)をトランスフエクションしたものでは、TNFによるアポトーシス誘導が有意に減弱していた。これらのことより、上皮細胞では、ケラチンは、TRADDとの結合を介して、TNF receptor 1シグナル経路に影響を与えていることが示唆された。ケラチン8結合蛋白質を酵母two-hybrid法で探索し、得られた陽性クローンのうち、核膜のnuclear pore complexの構成分子であるnucleoporin p62およびその類縁の新規蛋白質をケラチン8結合候補蛋白質として同定し、現在さらに解析を進めている。

我们鉴定出 Mrj 蛋白和 TNF 受体 1 相关死亡结构域蛋白 (TRADD)（属于 DnaJ/热休克蛋白 40 (Hsp40) 家族）是与角蛋白 18 结合的蛋白。 Mrj 作为共伴侣，调节角蛋白 8 和 18 细丝组装，并参与细胞运动过程中的细丝重塑。中间丝的构建一般是由磷酸化和去磷酸化控制的，到目前为止我们已经分析过，但新发现的Mrj-Hsp70的控制是角蛋白8和18特有的。它被认为是一个典型的控制系统。 TRADD 特异性结合表达角蛋白的上皮细胞中的 1 型角蛋白。当不表达角蛋白和波形蛋白等中间丝的SW13细胞被迫表达角蛋白8和18以及角蛋白18的N末端（TRADD结合位点），并观察TNF对细胞凋亡诱导的作用时，结果发现，与对照载体相反，在用角蛋白8/18和角蛋白18的N末端(TRADD结合位点)转染的载体中，TNF诱导的细胞凋亡显着减弱。这些结果表明，在上皮细胞中，角蛋白通过与 TRADD 结合影响 TNF 受体 1 信号通路。我们使用酵母二杂交法寻找角蛋白8结合蛋白，在获得的阳性克隆中，我们鉴定了核膜核膜复合物的组成分子核孔蛋白p62以及与其相关的新蛋白角蛋白8结合蛋白候选蛋白质，我们目前正在进行进一步分析。