細胞分裂期に生じる中間径フェラメントリン酸化へのcdc2キナーゼ、suc1の関与

CDC2 激酶 suc1 参与细胞分裂过程中的中间发酵磷酸化

• 批准号: 05269228
• 负责人: 稲垣 昌樹
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05269228/
• 关键词: cdc2キナーゼ; 中間径フィラメント; カルモジュリン依存性キナーゼII; リン酸化反応

細胞分裂期(核分裂期と細胞質分裂期)に生じる中間径フィラメントのリン酸化の生物学的意義と遂行する蛋白質キナーゼについて研究している。1).核分裂期に作動する中間径フィラメントキナーゼとして我々はcdc2キナーゼである可能性を報告してきた。本年度の研究でこの点をより明らかにするため、ビメンチンのcdc2キナーゼ特異的リン酸化部位のリン酸化状態を脱リン酸化状態と識別して認識するマウスモノクローナル抗体の作成に成功した。2).この抗体は核分裂期にある細胞の中間径フィラメントと特異的に反応し、他の時期の中間径フィラメントとは反応しなかった。このことは我々の仮説が正しかったことを示している。3).in vitro でのリン酸化部位解析の結果より、細胞質分裂期に活性化される中間径フィラメントキナーゼの候補の1つとしてCa^<2+>カルモジュリン依存性キナーゼIIが浮かびあがった。現在この点を明らかにするために、中間径フィラメント蛋白質のカルモジュリン依存性キナーゼII特異的リン酸化部位のリン酸化状態を認識できるマウスモノクローナル抗体の作成をしている。

我们正在研究细胞分裂（核分裂和胞质分裂）过程中发生的中间丝磷酸化的生物学意义以及执行该过程的蛋白激酶。 1).我们报道CDC2激酶可能是一种在核分裂过程中起作用的中间丝激酶。在今年的研究中，为了进一步阐明这一点，我们成功创建了一种小鼠单克隆抗体，该抗体可以识别波形蛋白CDC2激酶特异性磷酸化位点的磷酸化状态，并将其与去磷酸化状态区分开来。 2).该抗体特异性地与核分裂阶段细胞的中间丝发生反应，但不与其他阶段的中间丝发生反应。这表明我们的假设是正确的。 3).体外磷酸化位点分析表明Ca 2+ 钙调蛋白依赖性激酶II是胞质分裂过程中激活的中间丝激酶的候选者。为了澄清这一点，我们目前正在创建一种小鼠单克隆抗体，它可以识别中间丝蛋白的钙调蛋白依赖性激酶II特异性磷酸化位点的磷酸化状态。

项目成果

Ando,S.,Inagaki,M.et al: "Phosphorylation of systhetic vimentin peptides by cdc2 kinase." Biochem.Biophys.Res.Commun.195. 837-843 (1993)

Ando,S.,Inagaki,M.等人：“cdc2 激酶对合成波形蛋白肽进行磷酸化。”

Kusubata,M.,Inagaki,M.et al: "cdc2 kinase phosphorylation of desmin at three serine/threonine residues in the aminoterminal head domain." Biochem.Biophys.Res.Commun.190. 927-934 (1993)

Kusubata,M.,Inagaki,M.等人：“氨基末端头域中三个丝氨酸/苏氨酸残基处结蛋白的 cdc2 激酶磷酸化。”

Ando,S.,Inagaki,M.et al: "Synthetic linear and cyclic prptides corresponding to the sites phosphorylated in histone H1 and vimentin as substrates of cdc2 kinase." Peptide Chemistry 1992,eds.by Yanaihara,N.449-451 (1993)

Ando,S.,Inagaki,M.等人：“与作为 cdc2 激酶底物的组蛋白 H1 和波形蛋白中磷酸化位点相对应的合成线性和环状肽。”

Tanaka,J.,Inagaki,M.et al: "Phosphorylation of a 62 KD procine alpha-internexin,a newly identified intermediate filament protein." Biochem.Biophys.Res.Commun.196. 115-123 (1993)

Tanaka,J.,Inagaki,M.等人：“62 KD 猪 α-internexin 的磷酸化，一种新鉴定的中间丝蛋白。”