がん細胞の浸潤・転移に果たす中間径フィラメントの役割の解明

阐明中间丝在癌细胞侵袭和转移中的作用

基本信息

批准号：
06281267
负责人：
稲垣昌樹
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はグリア酸性蛋白質やビメンチンの多彩なリン酸化部位のそれぞれについてそのリン酸化状態を特異的に認識するマウスモノクローナル抗体群の作製を行った。これら抗体をがん培養細胞株に用いることでがん細胞増殖に伴って、異なった時間経過と異なった細胞内局在で、3種の中間径フィラメントキナーゼが活性化されることを明らかにした。そのうち2つのキナーゼについては同定が完了し、cdc2キナーゼとカゼインキナーゼであることが明らかとなった。またG_0→G_1のシグナル伝達系と細胞骨格リン酸化反応との連関を明らかにするため、ジアシルグリセロール系のCキナーゼとIP_3/Ca^<2+>系のカルモジュリンキナーゼIIのビメンチン特異リン酸化部位(Cキナーゼ、ビメンチンSer33;カルモジュリンキナーゼII、ビメンチンSer82)のリン酸化状態を特異的に認識する抗体群を作製し、現在培養細胞を用いて調べている。またがん細胞にビメンチン遺伝子を導入し、ビメンチンのがん細胞における異所性発現とがん細胞における運動能の亢進との関連について検討した。しかしその結果、ビメンチンのがん細胞における異所性発現はがん細胞増殖やその運動能亢進に決定的に重要な役割を果たしているとの知見は得られなかった。

我们生成了一组小鼠单克隆抗体，它们特异性识别神经胶质酸性蛋白和波形蛋白的各个磷酸化位点的磷酸化状态。通过在培养的癌细胞系中使用这些抗体，我们发现随着癌细胞增殖，三种类型的中间丝激酶在不同的时间过程和不同的亚细胞位置被激活。其中两个激酶的鉴定已经完成，确定它们是CDC2激酶和酪蛋白激酶。此外，为了阐明G_0→G_1信号转导系统与细胞骨架磷酸化之间的联系，我们研究了基于二酰甘油的C激酶和基于IP_3/Ca^<2+>的钙调蛋白激酶II的波形蛋白特异性磷酸化位点（我们已经创建了一组特异性识别 C 激酶、波形蛋白 Ser33、钙调蛋白激酶 II、波形蛋白 Ser82 的磷酸化状态的抗体，目前正在使用培养细胞对其进行研究。我们还将波形蛋白基因引入癌细胞，并研究了癌细胞中波形蛋白的异位表达与癌细胞运动性增强之间的关系。然而，结果并未揭示癌细胞中波形蛋白的异位表达在癌细胞增殖和运动性增加中发挥关键作用。