癌細胞膜上のMMP9前躯体新規活性化機構の発見と癌細胞浸潤機序の解析

癌细胞膜MMP9前体新激活机制的发现及癌细胞侵袭机制分析

• 批准号: 12215112
• 负责人: 木戸 博
• 金额: $ 2.82万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215112/
• 关键词: 癌転移; マトリックスメタロプロテアーゼ; プロセシング; プラスミン; ミニプラスミン; 癌浸潤; アンチプラスミン

炎症性細胞の浸潤を伴う癌組織では、マトリックスメタロプロテアーゼのMTI-MMP,MMP-1,MMP-9前駆体に対する極めて強い活性化プロテアーゼの存在することを見出し、これを精製して一次構造を決定することに成功した。その結果このプロテアーゼは、従来人工的に作り得ることが知られていたが、体内での生理的意義の解明されていなかったミニプラスミンであり、同時にアンギオスタチンが形成されている事を見出した。本研究では疎水性と酵素活性の高まった膜結合型ミニプラスミンの、細胞膜上でのMMP-9前駆体の活性化機序と特異阻害剤の解析を行った。Pro-MMP-9過剰発現細胞を用いてPro-MMP-9の成熟型への変換を検定した。従来試験管内でPro-MMP-9を活性化するプロテアーゼとして、トリプシン、プラスミン、MMP-3などが挙げられていたが、これまでで最も強い活性化作用を示すと言われていたトリプシンよりもミニプラスミンはさらに強い前駆体型MMP-9の活性化作用を示すことが判明した。さらに興味深いことはプラスミンの生体内での強力な阻害剤と言われているアンチプラスミンの阻害を、ミニプラスミンは受けにくいことである。以上のようにプラスミンがミニプラスミンに変換されることにより、1.分子量の減少に伴う基質特異性の拡大。2.親水性のアンギオスタチンの除去に伴う疎水性と膜結合性の獲得。3.リジン結合領域の除去によりアンチプラスミンへの親和性の消失といった新たな酵素学的特性が出現した。今後癌細胞の転移に、ミニプラスミンが直接どのようにかかわっているかを検討してゆく。

在炎性细胞侵袭的癌症组织中，基质金属蛋白酶发现MTI-MMP，MMP-1，MMP-9 MMP-9纯化的激活蛋白酶非常强大。结果，已知蛋白酶是人为制造的，但发现它是一种未在体内阐明的迷你质蛋白，同时也形成了纳维蛋白。在这项研究中，对具有高疏水性和酶活性的膜型微峰的细胞膜分析了MMP-9前体机理和特异性抑制剂。使用过度成熟的细胞测试了Pro-MMP-9 Pro-MMP-9向成熟类型的转化。胰蛋白酶，纤溶酶，MMP-3等被列为蛋白酶，在传统的试管中激活pro-MMP-9，但是与胰蛋白酶相比，据说它显示出迄今为止的激活效果。更强的前体身体MMP-9激活效果。更有趣的是，小质质蛋白很难接受抗纤溶酶抑制作用，据说这是纤溶酶活生物体中的强大抑制剂。如上所述，当纤溶酶转化为微息蛋白时，由于1所产生的底物特异性。分子量的降低。 2。疏水性和薄膜粘合性的获取与消除亲水性痛苦状态有关。 3。一种新的酶促特性，例如消除抗质蛋白的亲和力，通过去除电莱蛋白键合区域出现了。将来，我们将研究如何直接参与癌细胞转移。

项目成果

木戸博: "インフルエンザウイルス感染のメカニズム-基礎研究の進歩-"カレントテラピー. 18(11). 8-11 (2000)

Hiroshi Kido：“流感病毒感染机制——基础研究进展”，Current Therapy 18(11)。

Kenji Tani: "Chymase is a potent chemoattractant for human monocytes and neutrophils"J.Leuko.Biol.. 67(4). 585-589 (2000)

Kenji Tani：“食糜酶是人类单核细胞和中性粒细胞的有效化学引诱剂”J.Leuko.Biol.. 67(4)。

Dong Ryoung Kim: "Cloning and expression of novel mosaic serine proteases with and without a transmembrane domain from human lung"Biochimica et Biophysica Acta. (in press). (2001)

Dong Ryoung Kim：“来自人肺的具有和不具有跨膜结构域的新型嵌合丝氨酸蛋白酶的克隆和表达”Biochimica et Biophysicala Acta。

木戸博: "宿主側からみたインフルエンザウイルス感染のメカニズム"呼吸と循環. 48(11). 1105-1111 (2000)

Hiroshi Kido：“从宿主角度观察流感病毒感染的机制”，呼吸与循环，1105-1111（2000）。

Ye Chen: "Mast cell tryptase from pig lungs triggers infection by pneumotrophic Sendai and influenza A Virus"Eur.J.Biochem. 267(11). 3189-3197 (2000)

叶晨：“猪肺肥大细胞类胰蛋白酶引发肺营养性仙台病毒和甲型流感病毒感染”Eur.J.Biochem。