胚中心で発現するRAG遺伝子産物のB細胞レパトアの多様化と選択への関与

生发中心表达的 RAG 基因产物参与 B 细胞库多样化和选择

• 批准号: 12051230
• 负责人: 大森 斉
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12051230/
• 关键词: 抗体; 成熟B細胞; RAG遺伝子; V(D)J再構成; インターロイキン7; 親和性成熟; 体細胞変異

我々はマウスの胚中心(GC)B細胞において発現するrecombination activating geneの産物(RAG-1,RAG-2)がどのような生理的役割を担っているか検討した。胚中心ではBCR遺伝子の体細胞変異による多様化と正および負の選択により抗体の親和性成熟が進行する。そこで抗体の親和性成熟の過程にRAGによる抗体遺伝子の2次的再構成が直接寄与しているかどうか検討した。抗NPmAb(17.2.25)のVHDJH(VHT)を一方のall eleのJH部位に組み込んだ(QMxC57BL/6)F1マウス(以下F1と略称)を用いた(表現型VHT/JH k+/k-1+/1+)。F1マウスを、そのBCRに対して低親和性のハプテンであるp-nitrophenyl(pNP)-CGGで免疫し、pNPに対する親和性成熟過程を解析した。pNPでF1を免疫すると、クラススイッチを伴う抗pNP応答が誘導され、免疫後8日から16日にかけてpNPに対する親和性成熟が進行することが確認された。血清およびハイブリドーマの解析から、高親和性抗pNP抗体の多くがλ鎖を持つこと、親和性成熟に伴いλ陽性抗体の割合が増加することがわかった。リンパ節において、RAGの発現上昇、λ鎖再構成の指標であるRSシグナル配列の切断が見られたので、確かに末梢リンパ組織で、λ鎖の再構成が起こっていることが確認された。RAGの発現を抑制するために免疫後、抗IL-7Rα抗体を投与したところ、抗体産生量が低下することなく、(1)リンパ節細胞でのRAGの発現抑制、(2)λ鎖の再構成の抑制、(3)λ陽性抗体の割合の減少、(4)親和性成熟の抑制が起こることが確認された。これらの結果は胚中心でのλ鎖遺伝子のRAGによる再構成が親和性成熟に寄与し得ることを示している。

我们研究了小鼠生发中心 (GC) B 细胞中表达的重组激活基因产物（RAG-1 和 RAG-2）的生理作用。在生发中心，抗体亲和力成熟通过 BCR 基因体细胞突变以及正向和负向选择的多样化而进展。因此，我们研究了RAG对抗体基因的二次重排是否直接有助于抗体亲和力成熟的过程。使用其中抗NPmAb(17.2.25)的VHDJH(VHT)整合到一个全基因(QMxC57BL/6)的JH位点的F1小鼠(下文缩写为F1)(表型VHT/JH k+/k-1 )。+/1+)。用对BCR低亲和力的半抗原对硝基苯基(pNP)-CGG免疫F1小鼠，分析对pNP亲和力的成熟过程。证实用pNP免疫F1诱导了伴随类别转换的抗pNP反应，并且pNP的亲和力成熟在免疫后8至16天进行。对血清和杂交瘤的分析表明，许多高亲和力抗 pNP 抗体都具有 λ 链，并且 λ 阳性抗体的比例随着亲和力成熟而增加。在淋巴结中观察到 RAG 表达增加和 RS 信号序列裂解（这是 λ 链重排的指标），证实外周淋巴组织中确实发生了 λ 链重排。当免疫后施用抗IL-7Rα抗体来抑制RAG的表达时，产生的抗体量没有减少，结果显示（1）淋巴结细胞中RAG表达的抑制，以及（2）λ的再生证实(3)λ阳性抗体的比例减少，(4)亲和力成熟受到抑制。这些结果表明，RAG 介导的生发中心 λ 链基因重排可能有助于亲和力成熟。

项目成果

大森斉: "胚中心における抗体遺伝子再構成とその生理的意義"感染・炎症・免疫. 30巻1号. 64-66 (2000)

Hitoshi Omori：“生发中心的抗体基因重排及其生理意义”《感染、炎症和免疫学》，第 30 卷，第 1. 64-66 期（2000 年）。

大森斉: "末梢リンパ組織における抗体遺伝子の再構成-抗体遺伝子の構造はどこまで柔軟か?"細胞工学. 19巻3号. 482-487 (2000)

Hitoshi Omori：“外周淋巴组织中抗体基因的重组 - 抗体基因的结构有多灵活？”，第 19 卷，第 3 期，482-487 (2000)。

Hitoshi Ohmori: "Prevention of collagen-induced arthritis in DBA/1 mice by oral administration of AZ-9, a bacterial polysaccharide"Immunopharmacology. 49巻3号. 325-333 (2000)

Hitoshi Ohmori：“通过口服细菌多糖 AZ-9 预防 DBA/1 小鼠胶原诱导的关节炎”，《免疫药理学》第 49 卷，第 325-333 期（2000 年）。