Graft vs Host反応を利用した新しいガン治療法開発の試み

尝试利用移植物抗宿主反应开发新的癌症治疗方法

• 批准号: 11877191
• 负责人: 中内 啓光
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877191/
• 关键词: GVHD; GVL; GVT; DLT; FK506; Fas

Graft vs Tumor(GVT)反応を最大限に引き出すためには出来るだけ多くのアロT細胞を導入することが望ましい。しかしながら大量のアロT細胞の導入は強力なGVHDの誘導にもつながるため、GVHDが起こった際にこれを沈静化する機構が必要となる。この目的でヘルベスウイルスのチミジンキナーゼが用いられるが、これ自体がウイルス由来のタンパクであるためホストにとって異種抗原となってしまう。そこでホスト由来である低親和性NGF受容体とFK506 binding proteinおよびFas分子のDeath-domain(D-D)部分を含むキメラ分子を作製し、FK506投与によりキメラ分子が3量体を形成してD-D部分にFADDが結合して細胞にアポトーシスを誘導する系を確立した。実際に3T3細胞にこのキメラ分子を導入し、NFG受容体陽性細胞をFACSでソーティングする。このようにして確立したトランスファクタントにFK506を作用させると細胞にアポトーシスが誘導されることを確認することが出来た。あらかじめT細胞にこのキメラ分子を発現させておくことにより、GVHDを気にすることなくより効果的かつ安全にdonor lymphocyte transfusionやGVTを目指したアロT細胞の移入を行うことが可能になった。

为了最大限度地提高移植物抗肿瘤 (GVT) 反应，需要引入尽可能多的同种异体 T 细胞。然而，引入大量同种异体T细胞也会导致强烈GVHD的诱导，因此需要一种在GVHD发生时抑制GVHD的机制。赫布斯病毒胸苷激酶用于此目的，但由于它本身是病毒衍生的蛋白质，因此它成为宿主的外来抗原。因此，我们创建了一种嵌合分子，含有源自宿主的低亲和力 NGF 受体、FK506 结合蛋白和 Fas 分子的死亡结构域 (D-D) 部分，并且在施用 FK506 后，该嵌合分子形成三聚体并我们建立了一个系统，其中 FADD 结合诱导细胞凋亡。该嵌合分子实际上被引入3T3细胞中，并使用FACS对NFG受体阳性细胞进行分选。我们能够证实，当将FK506应用于如此建立的转因子时，在细胞中诱导了细胞凋亡。通过预先在T细胞中表达这种嵌合分子，可以更有效、更安全地转移同种异体T细胞用于供体淋巴细胞输注和GVT，而无需担心GVHD。

项目成果

Hiromitsu Nakauchi.: "The Hematopoietic Stem Cell.edited by Shirkis,Orlic and Kantz."Academic Press. 14 (1999)

Hiromitsu Nakauchi.：“造血干细胞。由 Shirkis、Orlic 和 Kantz 编辑。”学术出版社。