発生工学的手法を用いた固型臓器再生の試み

利用发育工程技术进行实体器官再生的尝试

• 批准号: 19659066
• 负责人: 中内 啓光
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659066/
• 关键词: 固型臓器再生; ES細胞; 膵臓; 臓器再生; blastcyst complementation; ES cells; 賢臓; Sall 1

ホルモン投与により過排卵誘発を施した雌のpdx-1+/マウスを同雄マウスと交配させ、3.5日目に子宮灌流法により胚盤胞を採取する。得られた胚盤胞にβ-アクチンプローモークー下でGFPを発現するドナーES細胞をピエゾーマイクロマニピュレークーを用い10〜12個注入後、精管結紫マウスと交尾後2.5日後の偽妊娠マウスの子宮へ移植し、産仔を得た。新生児期において全ての産仔で膵臓の形成が確認された。ヘテロ同士の交配であるため、得られた産仔の遺伝子解析をおこない、pdx1遺伝子座について+/+、-/+、-/-のタイピングを行なった。免疫組織染色で形態を解析したところ、-/-マウスに形成された眸臓では全ての細胞がES細胞由来であった。また、成体まで成育したマウスについては糖耐性試験を行い、インスリン分泌機能が正常であることを確認した。

将通过激素施用诱导超排卵的雌性PDX-1+/小鼠与相同的雄性小鼠交配，并在第3.5天通过子宫灌注收集囊胚。使用压电显微操作器将10至12个在β-肌动蛋白促进下表达GFP的供体ES细胞注射到获得的囊胚中，在与输精管小鼠交配后2.5天诱导假妊娠，并将其移植到小鼠的子宫中并产仔。获得。所有后代在新生儿期均证实胰腺形成。由于这是杂合杂交，因此对所得窝进行了遗传分析，并将 pdx1 基因位点分为 +/+、-/+ 和 -/-。使用免疫组织化学染色的形态学分析显示，-/-小鼠眼睛中形成的所有细胞均源自ES细胞。此外，对已生长至成年的小鼠进行了葡萄糖耐量试验，证实其胰岛素分泌功能正常。

项目成果

Recipient-derived cells after cord blood transplantation: dynamics by multicolor FACS, reflecting graft failure and relapse.

脐带血移植后受体来源的细胞：多色 FACS 动态，反映移植失败和复发。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Biol Blood Marrow Transplant. 14
• 作者: Watanabe N;Takahashi S;Ishige M;Ishii Y;Ooji;Tomonari A;Tsukada N;Konuma T;Kato S;Sato A;Tojo A;Nakauchi H.
• 通讯作者: Nakauchi H.

Sall4 regulates cell fate decision in fetal hepatic stem/progenitor cells.1

Sall4 调节胎儿肝干/祖细胞的细胞命运决定。1

• 发表时间: 2009
• 期刊: Gastronterology. 136
• 作者: Oikawa T;Kamiya A;Kakinuma S;Zeniya M;Nishinakamura R;Tajiri H;Nakauchi H.
• 通讯作者: Nakauchi H.

Flow cytometric isolation and clonal indentification of self-renewing bipotent hepatic progenitor cells in adult mouse liver.

成年小鼠肝脏中自我更新双能肝祖细胞的流式细胞术分离和克隆鉴定。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Hepatlogy 48
• 作者: Suzuki;A;Sekiya S;Onishi M;Oshima N;Kiyonari H;Nakauchi H;Taniguchi H.
• 通讯作者: Taniguchi H.

A rapid and efficient strategy to generate allele-specific anti-HLA monoclonal antibodies.

一种快速有效的策略来生成等位基因特异性抗 HLA 单克隆抗体。

• 发表时间: 2009
• 期刊: J Immunol Methods. 343
• 作者: Yamazaki S;Suzuki N;Saito T;Ishii Y;Takiguchi M;Nakauchi H;Watanabe N.
• 通讯作者: Watanabe N.