シナプス可塑性を制御する細胞接着分子の分子生理学的解析

控制突触可塑性的细胞粘附分子的分子生理学分析

基本信息

批准号：
11170210
负责人：
真鍋俊也
金额：
$ 6.34万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

1.細胞接着分子であるカドヘリン11を欠損するマウスでは、正常シナプス伝達には異常が見られないが、海馬CA1領域での長期増強が増大し、さらに長期増強の飽和レベルが高いことから、シナプス伝達効率の可変域が増大していることがわかった。この変異マウスでは、恐怖心などの情動に異常があることがわかった。2.細胞接着分子であるテレンセファリンを欠損するマウスでは、正常シナプス伝達には異常が見られないが、海馬CA1領域での長期増強が増大し、さらに長期増強の飽和レベルが高いことから、シナプス伝達効率の可変域が増大していることがわかった。また、学習・記憶テストにおいて成績が野生型よりもよいことが明らかとなった。3.海馬CA1領域のNMDA受容体のチロシンリン酸化がH-Rasにより制御されていることと、チロシンリン酸化の亢進によりNMDA受容体シナプス応答が増大し、長期増強が増大していることを明らかにした。4.NMDA受容体の単一チャネル特性をH-ras(-/-)マウスと野生型マウスで比較・検討したが、細胞体から引き抜いたパッチでは有意な差は見られなかった。これは、スパインに存在する酵素群と接触していないことによる可能性があるので、今後はnon-stationary analysisを行う予定である。5.Srcファミリーチロシンリン酸化酵素によりリン酸化されるNMDA受容体NR2Bサブユニットのチロシン残基(チロシン1472)を同定した。このチロシンにリン酸化が入っているものだけを選択的に認識する抗体を作製し、それを用いて、生体の海馬においてもこの部位のリン酸化が起こっており、その程度が発達にしたがって増大することを見出した。さらに、海馬スライスCA1領域の長期増強の発現に伴って、NR2Bサブユニットのチロシン1472のリン酸化が増大することを明らかにした。

1. 缺乏细胞粘附分子cadherin-11的小鼠，正常突触传递未见异常，但海马CA1区长时程增强增加，且长时程增强饱和度较高，表明发现突触传递效率的可变范围增大。这只突变小鼠被发现存在恐惧等情绪异常。 2.缺乏细胞粘附分子端脑素的小鼠，正常突触传递未见异常，但海马CA1区长时程增强增加，且长时程增强的饱和水平较高。传输效率提高了。研究还表明，它们在学习和记忆测试中的表现优于野生型。 3. 我们发现海马 CA1 区 NMDA 受体的酪氨酸磷酸化受到 H-Ras 的调节，并且增强的酪氨酸磷酸化会增加 NMDA 受体突触反应并增加长时程增强。 4.我们比较并检测了H-ras(-/-)小鼠和野生型小鼠NMDA受体的单通道特性，但从细胞体提取的斑块没有观察到显着差异。这可能是由于缺乏与脊柱中存在的酶的接触，因此我们计划将来进行非平稳分析。 5. 我们在 NMDA 受体 NR2B 亚基中发现了一个酪氨酸残基（酪氨酸 1472），该残基被 Src 家族酪氨酸激酶磷酸化。我们创建了一种仅选择性识别那些磷酸化酪氨酸的抗体，并用它发现该位点的磷酸化也发生在生物体的海马体中，并且磷酸化程度随着发育而增加。此外，我们还发现，NR2B 亚基的酪氨酸 1472 的磷酸化随着海马切片 CA1 区长时程增强的发展而增加。